非无菌产品微生物检查：微生物计数法.ppt

供试品检查—检验量 修订前 1、除另有规定外，一般供试品的检验量为10g或10ml； 2、膜剂为 100cm2； 3、贵重药品、微量包装药品的检验量可酌减。 4、检验时,应从2个以上最小包装单位中取供试品,大蜜丸不得少于4丸,膜剂不得少于4片。 5、一般应随机抽取不少于检验用量（两个以上最小包装单位）的3倍量供试品。 6、要求检查沙门菌的供试品,其检验量应增加20g或20ml（其中10g或10ml用于阳性对照试验）。 修订后 1、除另有规定外,一般供试品的检验量为10g或10ml； 2、膜剂为 100cm2； 3、贵重药品、微量包装药品的检验量可以酌减； 5、检验时,应从2个以上最小包装单位中取供试品,大蜜丸不得少于4丸,膜剂不得少于4片。 5、一般应随机抽取供试品，取规定容器数，混合，取规定量供试品进行检验。 供试品检查 修订前 按计数方法的验证试验确认的程序进行供试液的制备，用稀释液稀释成1:10、1:102、1:103等稀释级的供试液 。 修订后 按照计数方法适用性试验确认的计数方法进行供试品中需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数的检查。 供试品检查—培养 修订前 ⒈计数方法包括平皿法和薄膜过滤法，检查时，按已验证计数方法进行供试品细菌、霉菌和酵母菌数测定。 ⒉细菌30～35℃培养3天， 霉菌和酵母菌23～28℃培养5天， 必要时可适当延长7天。 修订后 ⒈按计数方法适用性试验确认计数方法进行供试品中需氧菌总数、霉菌 及酵母菌总数的测定。 ⒉胰酪大豆胨琼脂平板在30～35℃培养3-5天 沙氏葡萄糖琼脂平板在20～25℃培养5～7天 MPN法和供试品接种，所有试验管在30～35℃ 培养3～5天。 供试品检查—计数 修订前 细菌计数:营养琼脂培养基 霉菌与酵母菌计数:玫瑰红钠培养基 酵母菌计数:酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基 修订后 需氧菌总数:胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的总菌落数(包括真菌菌落数) 霉菌及酵母菌总数:沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的总菌落数(包括细菌菌落数)。 供试品检查—结果判断 修订前 若霉菌与酵母菌、玫瑰红钠上生长营养琼脂上生长细菌，则分别点计霉菌和酵母菌、细菌数。 将营养琼脂上霉菌和酵母菌数或玫瑰红钠上细菌数与玫瑰红钠上霉菌和酵母菌或营养琼脂上细菌数进行比较。 以菌落数高的培养基中菌数为计数结果。 修订后 若因沙氏葡萄糖琼脂上生长的细菌使霉菌及酵母菌计数结果不符合微生物限度要求,可使用含抗生素(如氯霉素、庆大霉素)的沙氏葡萄糖琼脂中或选择性培养基(如玫瑰红钠琼脂培养基)。 使用选择性培养基时,应进行培养基适用性检查。 若采用MPN法。测定结果为需氧菌总数 * * 修订前 应≤10cfu 、 ≤100cfu 、 ≤1000cfu 、≤10000cfu 若供试品的细菌数、霉菌数和酵母菌数其中任何一项不符合该品种项下的规定，应从同一批样品中随机抽样，独立复试两次，以三次结果的平均值报告菌数。 修订后 101cfu： 可接受的最大限度为20； 102cfu： 可接受的最大限度为200； 103cfu： 可接受的最大限度为 2000： 依此类推。 ⒈若供试品的需氧菌总数、霉菌及酵母菌总数的检查结果均符合该品种项下的规定，判供试品符合规定； ⒉若其中任何一项不符合该品种项下的规定，判供试品不符合规定。 菌数计数结果判断修订  计数标准 标准理解 1、该理论可参见《中国药典》附录替代方法验证的一般要求及美国药典1227结果精密度分析; 2、微生物计数结果的精密度与菌数的多少有直接关系，污染量偏小或偏大均有可能造成结果的误差较大。 可以解释培养基适用性检查和方法适用性检查的可接受限50～200%的含义。   供试品检