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2.微柱凝胶技术 微柱凝胶技术是液相技术与固相技术的巧妙组合，是凝胶过滤技术、离心技术、红细胞凝集试验技术（特异性抗体抗原反应）的完美结合。通过对凝胶种类的选择和凝胶浓度的调节来控制分子筛孔径大小,使分子筛只允许游离红细胞通过,从而达到分辩凝集红细胞和非凝集红细胞的目的。微柱凝胶技术是目前最易大规模推广、最适于常规试验的最好血型血清学试验技术。 微柱凝胶技术原理 当抗原抗体反应时红细胞发生凝集（包括已致敏的红细胞通过抗人球蛋白的桥连作用发生的凝集），在一定的离心力作用下，凝集的红细胞不能通过凝胶间隙而留在凝胶分离柱上层或分散在凝胶分离柱中，此为阳性反应；而未凝集的红细胞在离心力的作用下可通过凝胶间隙而沉积于凝胶分离柱的底部，此为阴性反应。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 微柱凝胶种类 （一）中性胶（又称空白胶，仅含有葡聚糖凝胶）：用做检测IgM抗体与相应抗原红细胞的反应。如ABO反定型。 （二）特异性胶（如加入过抗-A、抗-B、抗-D等特异性抗体的凝胶）：利用包被的抗体检测相应抗原。 （三）抗球蛋白胶（包被了单特异性或多特异性抗人球蛋白试剂的凝胶）。用于检测IgG抗体与相应抗原红细胞的反应。 微柱凝胶法做ABO、Rh血型实例 红细胞抗原与相应抗体在微柱凝胶介质中发生凝集发应 ABO、Rh血型鉴定质量控制 1、技术上的失误 假阴性①抗体试剂与红细胞比例不对应。 ②红细胞悬液过淡。 ③离心速度、时间不够。 ④忽略观察溶血现象，因溶血也是阳性反应。 假阳性①离心速度过大或离心时间过长。 ②使用了受到细菌污染的抗体试剂和盐水。 ③使用不干净的试管等。 造成假阳性或假阴性的人为原因： ①标本张冠李戴。 ②未加入或使用了失效的试剂。 ③操作者不能正确识别和解释试验结果。 ④人为的书写错误。 2、被检人血清标本的问题 ①婴儿及老年人，4～6月婴儿血清中ABO抗体很弱 ②疾病影响引起假凝集或弱凝集。 ③治疗措施的影响 3、被检者红细胞的问题 ①红细胞上抗原位点过少或抗原性减弱如弱A、弱B亚型和白血症或恶性肿瘤患者 ②红细胞获得性异常，如O型或A型病人因肠道细菌感染使红细胞上获得类B抗原 ③细菌污染 正反定型结果不一致的解决办法 首先重复试验，不符则继续做下列试验。 （1）重新采集献血员和受血者的新鲜血液标本 （2）多次洗涤被测红细胞和标准红细胞 （3）用抗A1、抗AB检测红细胞。 （4）如怀疑血清中有抗A1，可用数份A2红细胞标本进行检验。 （5）如果试验结果未见凝集，应将正向及反向试验至少在室温在40℃放置30min，用显微镜检查核实。 （6）若怀疑是由于抗原减弱造成的正反定型不符，可进一步做木瓜酶试验、直接抗球蛋白试验、吸收放散试验等加以鉴别。 二、 Rh血型 （Rh －Rhesus monkey的缩写） 2、主要类型 Rh阴性：RBC上无Rh（D）抗原 Rh阳性：RBC上有Rh（D）抗原 1、系统组成： (1)抗原：RhD、RhC、Rhc、RhE、Rhe 主要成分为多肽链 (2)抗体：抗-D、抗-C 、抗-c 、抗-E 、抗-e 性质：IgG性质 (3)基因：RHD和RHCE基因 3、特点 （1）绝大多数为IgG抗体 Rh阴性者接受Rh阳性血后通过免疫产生免疫性抗体。 （2）抗体可通过胎盘 其抗原性强弱依次为D、E、C、c、e，以D抗原性最强。 我们称含D抗原的红细胞为Rh阳性，不含D抗原的为Rh阴性。我国人中Rh阴性者甚为少见。 （3）天然抗体极少。抗D抗体最常见 Rh抗体有完全抗体和不完全抗体两种。完全抗体在机体受抗原刺激初期出现，一般属IgM型，分子量大，不能通过胎盘，存留时间短。机体继续受抗原刺激，则出现不完全抗体，属IgG型，分子量小，可通过胎盘，存留时间长，常在完全抗体出现后出现，引起新生儿溶血病。 4、Rh血型的鉴定 仅用抗D血清进行鉴定，粗略地分为Rh阳性和阴性两类。 鉴定方法 完全抗体：生理盐水凝集试验 不完全抗体：胶体介质法、木瓜酶法、抗人球蛋白法等 5、Rh血型系统的临床意义 Rh血型系统所致的溶血性输血反应：第一次输血不必考虑Rh血型，第二次输血需考虑Rh血型是否相同。 新生儿Rh溶血病：Rh-的母亲 ①若输过血，怀孕后其孕儿为Rh+者，孕妇的抗Rh的抗体，可通过胎盘导致胎儿溶血。②第一次孕儿为Rh+，胎儿的RBC因某种原因(如胎盘绒毛脱落)进入母体，或分娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体内产生抗Rh的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗Rh