GB/T 18630-2002蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯农药残留量的简易检验方法　酶抑制法.pdf

67.040 跳3 中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准 GB/T18630-2002 蔬菜中有机磷及氨基甲酸醋农药 残留量的简易检验方法 酶抑制法 Methodforsimpledeterminationof organophosphorusandcarbamatepesticide residuesinvegetables-Enzymeinhibitionmethod 2002一01一28发布 2002一06一01实施 中 华 人 民 共 和 国 发 布 国家质 量监督检验检疫 总局 213 cB/T18630-2002 前 言 本标准在制定过程中主要参考了以下标准: 食品中有机磷农药残留测定 胆碱酷酶抑制法(AOAC1229.049-29.055) 本标准的附录A是规范性附录。 本标准由辽宁省质量技术监督局提出。 本标准由沈阳农业大学、沈阳市质量技术监督局苏家屯分局负责起草。 本标准主要起草人:周艳明、高淑英、张会娟、王晓光、李亮亮、李海峰、吴小琳、牛森 GB/r18630-2002 蔬菜中有机磷及氨基甲酸醋农药 残留量的简易检验方法 酶抑制法 1 范围 本标准规定了用酶抑制法测定蔬菜中有机磷农药及氨基甲酸醋农药残留的简易检验方法。 本标准适用于蔬菜中有机磷农药及氨基甲酸醋农药残留的测定。 2 原理 有机磷农药及氨基甲酸醋类农药对胆碱酷酶的活性有抑制作用，在一定条件下，其抑制率取决于农 药种类及其含量 在pH7^8的溶液中，碘化硫代乙酞胆碱被胆碱醋酶水解，生成硫代胆碱。硫代胆碱具有还原性，能 使蓝色的2,6一二抓靛酚褪色，褪色程度与胆碱醋酶活性正相关，可在600nm比色测定，酶活性愈高时， 吸光度值愈低。当样品提取液中有一定量的有机磷农药或氨基甲酸醋类农药存在时，酶活性受到抑制， 吸光度值则较高。据此，可判断样品中有机磷农药或氨基甲酸醋类农药的残留情况。样品提取液用氧化 剂氧化，可提高某些有机磷农药的抑制率，因而可提高其测定灵敏度，过量的氧化剂再用还原剂还原，以 免干扰测定。 3 试荆或材料 3.1底物溶液:2%碘化硫代乙酞胆碱水溶液,1g碘化硫代乙酞胆碱，加缓冲液溶解并定容至50mL. 3.2 缓冲液: pH7.71磷酸盐缓冲液: A液:1/15mol儿磷酸氢二钠溶液:称取磷酸氢二钠(Na2HP0,·12H户)2.3876g加水定容至 100mL, B液1/15mol/L磷酸二氢钾溶液:称取磷酸二氢钾。.9078g加水定容至100mL, 取A液90mL,B液10mL混合，即得pH7.71磷酸盐缓冲液。 3.3 显色剂;0.04%2,6一二抓靛酚水溶液。 3.4 氧化剂:0.5%次抓酸钙水溶液。 3.5 还原剂:10%亚硝酸钠水溶液。 3.6 胆碱醋酶液，。2g酶粉(其制备方法见附录A功U10mL缓冲液溶解。 3.7 脱色剂:活性炭。 3.8 丙酮:分析纯。 3-9 碳酸钙:分析纯。 4 装置 4.1 分光光度计。 GB/T18630-2002 5 分析步骤 以下操作可在 15C-30`C温度下进行。 5，1 试样的制备 蔬菜样品擦去表面泥水，取代表性食部，剪碎，取2g置于10mL烧杯中，加5MI丙酮浸泡5min, 不时振摇，加0.2g碳酸钙(对于番茄等酸性较强的样品可加0.3~0.4g)。若颜色较深，可加0.2g活性 炭 摇匀，过滤。 5.2 氧化 取0.5m工丙酮滤液于5mL烧杯中，吹干丙酮后，加。3m工缓冲液溶解。加人