课件：实验五新生儿溶血病.ppt

实验五 新生儿溶血病 （Hemolytic disease of the  newborn， HDN ） 新生儿溶血病的定义 HDN是指因母、婴血型不合而引起的胎儿或新生儿同种免疫性溶血，出现黄疸、贫血、水肿、肝脾肿大，甚至死胎、新生儿死亡等溶血病的症状和合并症。 HDN的分类 ABO-HDN Rh-HDN 其他血型系统-HDN ABO-HDN和Rh-HDN的区别 ABO-HDN Rh-HDN病因 ABO血型不和 Rh血型不和母亲血型 O型多见 Rh阴性婴儿血型 A、B、AB型 Rh阳性发病率 3-5% 较低免疫刺激 不需 孕产史、输血史首发胎数 第一胎 第二胎（外祖母学说除外）直抗 -～1+ 1+以上放散液制备 冷冻、热放散 乙醚放散换血治疗 O型RBC Rh血型同母亲 AB型血浆 ABO血型同婴儿型或O型血 新生儿溶血病检测的方法及原理 新生儿ABO及Rh血型鉴定 “三项试验” ： 直抗试验 游离试验 释放试验 实验方法 1、准备：离心分离血清和RBC，生理盐水洗涤RBC3次，取少量RBC配成3~5％的RBC悬液。血清和洗好的压积RBC备用。 2、新生儿ABO及Rh血型鉴定:试管法。 3、直接抗球蛋白试验: 3~5%RBC 1滴 抗球蛋白试剂2滴 3000rpm 离心15s 凝集：阳性 无凝集 加阳性对 照细胞 凝集：阴性 无凝集：抗球蛋白试剂失效 游离试验 ■原理 检测新生儿血清中是否存在针对 新生儿RBC血型抗原的IgG血型抗体。 检测出 A型－－－抗A B型－－－抗B AB型－－－抗A、抗B或抗A、B Rh阳性－－－抗D。 游离试验（抗球蛋白卡法） ABO-HDN游离试验 A型RBC B型RBC O型RBC 婴儿血清 Ac管 50μl 25μl Bc管 50μl 25μl Oc管 50μl 25μl Rh-HDN游离试验 1号细胞 2号细胞 3号细胞 婴儿血清 1 50μl 25μl 2 50μl 25μl 3 50μl 25μl 37℃孵育15min，以1030rpm离心10min。观察结果。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 ABO-HDN游离试验结果判断 Ac Bc Oc 意　　义 + - - 存在游离的抗A抗体 - + - 存在游离的抗B抗体 + + - 存在游离的抗A、抗B抗体或抗A、B抗体 +/- +/- + 存在游离的ABO血型系统以外抗体 - - - 没有游离抗体 只有当血清中检出相应抗体，同时新生儿RBC上又存在对应抗原时才认为游离试验是阳性。 Rh-HDN游离试验结果判断：任何一管出现凝集则血清中存在不规则抗体（抗－D?进一步做抗体鉴定)。3管均不出现凝集则血清中不存在不规则抗体。 放散试验 原理 利用特殊的方法将致敏在新生儿红细胞