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基因工程原理作业及答案 达，使转基因生物获得新的遗传性状的操作。 第一章 绪论 基因操作：对基因进行分离、分析、改造、检 测、表达、重组和转移等操作的总称。 基因重组：不同来源DNA分子通过共价连接（磷 酸二酯键）而组合成新的DNA分子的过程。 它们的相互关系：基因工程是通过基因重组实 1、假如从一个原核生物中cloning某基因（1-2kb）， 现的，但基因重组并不都是严格意义上的基因工程， 请谈谈它的基本步骤？ 基因重组是基因操作范畴的概念，包括实验研究和 ① 限制性内切酶切割外源DNA和载体 ②将外 生物技术的基因重组事件，而基因工程则专指为实 源DNA片段与载体连接 ③转化 ④筛选 践应用而进行的重组事件。基因操作是基因工程的 技术基础；基因克隆很多时候并不涉及遗传的改良。 2、什么叫基因工程（GeneEngineering），试从理 论和技术两个方面谈谈GeneEngineering诞生的基 4、为什么说基因工程是生物学和遗传学发展的必然 础？ 产物？ 基因工程：在体外将核酸分子插入病毒、质粒 生物学和遗传学发展到现在无非就是向两个方 或其它载体分子，构成遗传物质的新组合，并使之 向发展，宏观和微观的，宏观发展无非就性状研究， 参入到原来没有这类分子的宿主细胞内，而能持续 外观特征等，而微观方面就是像小分子方向基因， 稳定地繁殖。 蛋白等方面发展，而研究和链接这两方面的桥梁就 理论基础：近几十年来，由于受到分子生物学、 基因工程技术。 分子遗传学发展的影响，基因分子生物学的研究取 得了前所未有的进步。而这些学科的综合成就，又 为基因工程的诞生奠定了坚实的理论基础： ① 在40年代确定了遗传信息的携带者，即基 因的分子载体是DNA而不是蛋白质，从而明确了遗 第二章 分子克隆工具酶 传的物质基础问题； ② 在50年代揭示了DNA分子的双螺旋结构模 型和半保留复制机理，解决了基因的自我复制和传 递的问题； 1、限制性内切酶可划分为哪几个类型，各自有何特 ③ 在50年代末期和60年代，相继提出了中 点？ 心法则和操纵子学说，并成功地破译了遗传密码， 根据酶的结构、作用的不同，可将限制性 从而阐明了遗传信息的流向和表达问题。 内切酶分为三种类型。Ⅱ型限制性内切酶具有 技术基础： 高度特异性的DNA裂解点,而Ⅰ型和Ⅲ型兼有 ①60年代-70年代，限制性核酸内切酶和DNA连 接酶解决了对DNA分子进行体外的切割和连接； 修饰（甲基化）作用和依赖于ATP的活性，但 ②基因克隆载体的出现 不能在识别序列上直接裂解DNA，故用途较少。 ③大肠杆菌转化体系的建立 因此，Ⅱ型限制性内切酶是基因工程和基因诊 ④60年代发展的琼脂糖凝胶电泳和Southern转 断中重要的