土霉素的生产工艺.ppt

制作人：白艳波 土霉素的生产工艺流程图 土霉素发酵工段 土霉素酸化过滤工段 脱色、结晶工段 离心、干燥工段 土霉素发酵工段 斜面孢子的制备 首先要求培养三支斜面孢子, 斜面孢子的培养基是由麸皮和琼脂组成，用水配制。 培养孢子条件：斜面孢子温度维持在36.5～36.8℃培养，不得高于37℃。湿度 55%～60% 。培养时间96个小时。将三支斜面孢子加入无菌水之后制成悬浮液。将悬浮液放置于4℃～6℃的冰箱中备用。 一级种子罐发酵 培养基成分 淀粉5.24kg，糊精5.24kg，黄豆饼粉1.74kg，酵母粉2.62kg，硫磺铵1.74 kg，碳酸钙1.39kg，氯化钠1.74kg，硫酸二氢钾10.49g，豆油1L。水329.6673kg 罐接种条件 周期25小时 耗糖0.76% 耗氮0.0308%，一级种子罐采用夹套式换热（自动温度调节），罐内生长弱无动力设备，设备密封。体积：500L，冷却水出口温度：40～50℃，排气压力：1.1～1.4公斤。一级罐发酵25个小时后进二级罐，要求31℃。 操作步骤 a、一级种子罐采用实罐蒸汽灭菌法灭菌，即把培养基装入经过清洗的发酵罐，通入蒸汽，对发酵罐和相应的管道进行灭菌。 b、接种。将培养好的孢子斜面接入罐中，要求先对接种口用甲醛消毒，接种动作一定要熟练迅速，减少染菌发生的机率。 c、调温。发酵过程中通过夹套式换热调节发酵罐温度，使之保持在31℃。 d、取样。每隔8小时从取样口取一次样，测量其pH，28小时时测量培养基中糖、氮的含量，发酵液的pH以及土霉素的效价。 e、消泡。 f、加料。经过约30小时左右的培养，培养基的颜色渐渐的变为黄色，趋于成熟。测量培养液的pH，当其值在6.0～6.4时即可作为种子移入二级种子罐 。 二级种子培养 培养基成分：淀粉188kg，玉米浆22kg，黄豆饼粉94kg，酵母粉22kg，硫磺铵30kg，碳酸钙28kg，氯化钠14kg，硫酸二氢钾1.13g，氯化钴50g，豆油1L。 操作步骤 a、灭菌。二级种子罐同样采用实罐灭菌的方式，对罐体和相应管道进行灭菌，然后把一级种子打入二级种子罐中，开始培养过程。 b、通气。土霉素是好氧霉菌，因此需要给罐内不断的通入空气，并且用搅拌桨不断的搅拌，以增加氧气的扩散和热量的交换。 c、消泡。在这可能引起大量泡沫的产生，所以需要添加消泡剂取出泡沫。 d、调温。土霉素的最适生长温度为31℃，在发酵热，搅拌热等热源的作用下可能使发酵罐内的温度偏离，因此需要通入冷却水调节发酵罐的温度。 e、取样。17～19小时时取样检测种子液pH，28小时时取样测量C、N、种子液效价和pH，并作出相关记录。 发酵条件：如果pH大于6.0，效价在800 u/m1左右即可将其打入发酵罐中。 三级发酵罐发酵 培养基成分 淀粉546kg，淀粉酶30kg，淀粉乳黄豆饼粉21kg，碳酸钙6.56kg，氯化钠21kg，硫酸二氢钾6.6kg，水10308kg. 发酵条件 为了尽可能提高土霉素得产量，三级发酵分为30℃和31℃两个控制阶段。即在0～50h温度维持在31±1℃，51～150h时温度保持在30±1℃，151h～放罐温度保持在31±1℃。三级发酵大约需 要八天左右的发酵时间。通氮量的多少参考pH值。要求100小时前pH在6.3～6.5，100小时后pH6.2～6.3 . 操作步骤 a、灭菌接种。三级发酵是土霉素大量产生的时期，发酵罐和相应管道经过灭菌后，将二级种子液打入发酵罐，开始发酵过程。 b、通气。为了给土霉素的生长提供充足的氧气，保持最适生长温度需要给发酵罐加上搅拌装置。 c、消泡。为了防止气泡的大量产生需要给发酵罐内添加消泡剂，本工艺主要采用泡敌作为消泡剂。 d、控温。在多种热源的作用下，可能使得发酵罐内的热量无法及时地散失，使发酵罐内温度不断上升，需要为发酵罐通入冷却水，以便及时地将热量带走。 e、补料。随着发酵的进行，营养物质的浓度不断下降，因此要通过补料罐和氨罐为其提供营养。 土霉素酸化过滤工段 酸化 酸化概述 在土霉素生产过程中，酸化是一个非常重要的工段，土霉素能和钙、镁等金属离子，某些季胺盐、碱等形成复合物而沉淀(即不镕性的络合品)。在发酵过程中，这些复合物积聚在菌丝中，而在液体中的浓度不高，因此酸化的目的是为了把菌体杀死，并使菌体产生的土霉素溶于酸化液中，以便过滤时滤渣中残存较少的土霉素，从而使生产率提高。 发酵液中的杂质如高价无机离子(Ca2+、Fe2+、Mg2+ )和蛋白质在离子交换的过程中对提炼影响很大，不利于树脂对土霉素的吸附。因此，采用草酸和磷酸去