葡萄砧木-抗砧3号组织培养快繁技术初探.docVIP

葡萄砧木-抗砧3号组织培养快繁技术初探-农学论文 葡萄砧木-抗砧3号组织培养快繁技术初探 张爱华，容新民，王富霞 （石河子农业科学研究院，新疆 石河子 832000） 摘要：本文以葡萄砧木一抗砧3号的当年生嫩枝为材料，初步探讨了该品种的组培快繁技术．为下一步的工厂化育苗奠定了一定的基础。试验结果表明：适宜该砧木品种的初代培养基为GS培养基，萌芽率最高达到74.07%；最适继代培养基为GS(6-BA0.4mg/L +IAA0.05mg/L)，生根率96%，增值倍数4.5。 关键词 ：葡萄砧木；组织培养；快繁技术 抗砧3号是中国农业科学院郑州果树研究所于1998年以河岸580为母本，S04为父本杂交育成的葡萄砧木新品种，2009年通过了河南省林木品种审定委员会审定。该砧木品种植株生长旺盛，新梢生长半直立，无茸毛，卷须分布不连续，节间背侧淡绿色，腹侧浅红色。成熟枝条表面光滑。耐盐碱，抗寒性强于巨峰和S04，但弱于贝达。经石河子农业科学研究院试验，其与本地部分品种嫁接亲和性较好，但在石河子地区采用普通方法繁殖系数较低，且不易成活，为此，我们开展了该品种的组培快繁技术试验，以满足嫁接苗生产用苗的需要。 1材料与方法 1.1试验材料 供试材料取自石河子农业科学研究院葡萄研究所引种的葡萄砧木品种一抗砧3号的当年生嫩梢。取材时间为2012年6月下旬至8月上旬。 1.2试验方法 1.2.1外植体的采集和消毒 将采集的嫩梢先用自来水冲洗2~3h以除去表面灰尘，然后用5%的84消毒液消毒10min，用无菌水冲洗3次，在无菌条件下，于75%的酒精中快速消毒8s立即用无菌水冲洗3次，在O.l%的升汞中消毒6~8min（视材料的幼嫩程度而定）后，用无菌水冲洗4~5次以清除残留在枝条表面的升汞。将消毒好的砧木枝条剪成单芽茎段，接入初代培养基中。 1.2.2初代培养基的筛选 采用MS、1/2MS（MS基本培养基大量元素和微量元素浓度减半，铁盐浓度不变，其它各成分同于MS，下同）和GS基本培养基，附加15~30 g/L的食用白糖，7.0g/L的琼脂，pH值调至5.8~ 6.0，接入供试品种一抗砧3号的外植体。配制好的培养基在121℃下高压灭菌20 min。培养条件：培养温度25~ 28℃，光照强度2000Lx，光照时间12 h/d。接种40d后统计萌芽率。 1.2.3继代诱导生根培养基的筛选 在GS培养基中分别加入不同浓度的6-BA和IAA接入供试品种，以选择砧木品种最佳的继代诱导生根培养基。接种30 d后统计分析不同培养基对葡萄砧木品种组培苗生根的影响。 1.2.4炼苗与移栽 将株高5~6cm具有2~3条根的试管苗逐步转移到散射光的自然环境中炼苗5~ 7d，从瓶中取出，洗净根部培养基，再用装有配比好营养土的8cm×8cm的营养钵进行移栽。在温室条件下，相对湿度控制在80%以上，温度控制在28~32℃下培养炼苗，试管苗成活率可达90%以上。 2结果与分析 从表1可知，抗砧3号外植体在不同培养基上萌芽率差异极显著。其中，在GS培养基中的萌芽率最高达到74.07%．并且萌发正常健壮的嫩芽比例也较高，接种基部愈伤组织小，而在其它培养基上，接种基部愈伤组织较大。由此初步确定出抗砧3号较适宜初代基础培养基为GS培养基。 2.2继代诱导生根培养基筛选 从表2试验数据可以看出，当IAA浓度一定时，6-BA的浓度对单芽茎段生根及增殖具有不同程度的影响，随着6-BA浓度的增加，单芽茎段生根率及增殖倍数也呈现上升趋势，但是达到一定浓度后，反而呈现下降的趋势，但在试验浓度内变化不明显。当6-BA浓度一定时，随着IAA浓度的变化，其生根率及增值倍数也呈现先高后低的类似结果。说明不同浓度的2种激素对抗砧3号的萌芽均具有不同的促进和抑制作用，且相互影响。 方差分析结果表明，IAA浓度在0.05mg/L，6-BA浓度在0.4mg/L时，抗砧3号的生根率和增值倍数最高，与其他处理存在极显著差异，并且根茎粗壮，叶色深绿，因此，可确定6-BA0.4 mg/L+IAA0.0 mg/L为该品种的继代培养基最优激素配比。 3小结 （1）通过对初代培养基萌芽试验数据进行方差分析，进而筛选出在试验培养基类型内，抗砧3号初代培养的最佳培养基为GS．其萌芽率最高达到74.07%。（2）植物激素是影响植株再生的另一个关键因素。试验结果表明，6-BA和IAA浓度的过高或过低均影响葡萄砧木单芽茎段的生根及增值，且