HPLC分析胰岛素开链反应教学实验设计.PDF

　第 27 卷 第 9 期 实 验 室 研 究 与 探 索 Vol. 27 No. 9　 　2008年 9 月 RESEARCH AND EXPLORA T ION IN LABORA TORY Sep. 2008　 HPLC 分析胰岛素开链反应的教学实验设计 a a a b a 白　晨 , 　吴 　刚 , 　张 　翼 , 　黄铮宇 , 　陆　红 (复旦大学 a. 生物科学教学实验中心生物化学实验室 ; b. 信息科学与工程学院 ,上海 200433) 摘 　要 :设计 D TT还原胰岛素 , HPLC再现 A 、B 链开链反应过程的生物化学实验 。筛选出最适还原反 ( ) 应条件 ,最佳 HPLC分离条件 。通过质谱 MALD ITOFM S 分析确定了产物的结构 。实验操作简便 ,结 果稳定 ,再现性好 ,通过本实验学生能更好地理解和掌握 HPLC 的分析原理 、操作方法及其在生命科学 研究中的重要意义 。 关键词 :高校液相色谱 ;胰岛素 ;二硫苏糖醇 中图分类号 : Q5　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 1006 - 7 167 (2008) 09 - 00 17 - 03 A Tea ch ing Exp e rmi en t on HPLC Ana ly sis o f In su lin U nfo ld ing a a a b a BA I Chen , 　WU Gang , 　ZHAN G Yi , 　HUAN G Z heng y u , 　L U H ong ( a. L aboratory of B iochem istry, Teach ing Cen ter of B io logy; b. Schoo l of Inform ation Science and Engineering, Fudan U n iverisity, Shanghai 200433 , Ch ina) A b stract: Th is article de signed an exp erim en t where in su lin wa s first reduced and unfo lded by D TT, and then H PLC wa s u sed to rep re sen t the A and B chain s. It develop ed the mo st p robab le condition s for the reduction reaction , found the be st H PLC iso lation m ethod, and m ade a confirm ation of each samp le u sing MALD ITOFM S. The exp erim en t is ea sy to p erform , the re su lt is invariab le, and in add ition , it ha s a de sired rep roducib ility. It is help fu l for co llege studen ts to have a better understanding of the HPLC p rincip le s, to m