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* 第三节 动物的克隆 核心要点突破 情景导引 基础自主梳理 知能过关演练 第三节 克隆羊多莉的诞生,为动物细胞工,程的发展和研究开辟了新的篇章。它,实现了通过动物核移植技术创造新个,体的方法,从而也证明了动物细胞核的,全能性,为畜牧业、医药卫生等领域展,示了广泛的应用前景。 情景导引 思考:(1)克隆羊多莉属于哪一种生殖方式? (2)多莉的克隆过程主要采用了哪种生物技术? 【提示】 (1)无性生殖。 (2)核移植等。 基础自主梳理 一、动物细胞培养与组织培养 1.动物细胞培养 首先,将动物体内的一部分组织取出,经过机械消化或______消化,使其分散成单个的细胞,然后,在人工控制的培养条件下,使这些细胞得以生存并保持生长、分裂及至___________和有规律的衰老、死亡等生命活动现象。 胰酶 接触抑制 2.动物组织培养 动物组织在体外及人工条件下维持__________或___________。综合细胞培养和组织培养的含义和规律,两者在一定程度上可以看作是同义语,因此可将它们统称为组织培养(组培)。 二、动物组织培养技术的发展 1.动物组织培养的萌芽时期在_________。 2.真正的组织培养开始于1907年。 3.大量_________的建成,标志着组织培养工作进入了全新阶段。 生活状态 生长特性 19世纪 细胞系 三、细胞系、细胞株的含义 细胞系泛指可传代的细胞,细胞株是具有___________的细胞系。 特殊性质 思考感悟 1.动物细胞培养中,出现遗传物质改变的细胞是什么? 【提示】 细胞系。 四、动物克隆培养法 1.概念 把一个________从群体中分离出来单独培养,使之繁衍成一个新的细胞群体的技术。 2.细胞克隆的最基本要求 必须肯定所建成的克隆来源于_________。 3.提高细胞克隆形成率的措施 选择适宜的培养基、添加______,以滋养细胞支持生长、_______刺激、使用CO2培养箱调节pH等。 单细胞 单个细胞 血清 激素 五、动物细胞全能性的表现程度及动物难以克隆的原因 1.动物细胞全能性的表现程度 (1)________及其第一次卵裂所得的2个子细胞,都可发育成完整个体。 (2)有的细胞只具有分化出多种组织细胞的潜能,这样的细胞叫做__________。 例:多能造血干细胞,可分化为红细胞、白细胞和血小板等。 (3)有的只能分化为___________,如单能造血干细胞。 受精卵 多能细胞 一种细胞 (4)有的已经分化,不再分化为其他细胞,甚至终生不再分裂,如高度分化的神经细胞。 (5)低等动物细胞的全能性一般比较_______体现。 2.动物难以克隆的根本原因 动物细胞的_____________使得细胞发生了基因的差异表达,有的开放,有的关闭。基因组中基因的活动很不完全,不能像受精卵那样发挥细胞的全能性。 六、动物细胞核移植的概念和程序 1.概念 容易 细胞分化 所谓核移植,就是利用一个细胞的___________________来取代另一细胞中的细胞核,形成一个重建的“合子”。 2.程序 首先,将未受精卵细胞的细胞核吸出。然后,将供体细胞细胞核取出与_________________融合,形成重组细胞,促使其发育为早期胚胎,到一定程度时,植入母体子宫中,发育成个体。 细胞核(供体核) 去核的卵细胞 思考感悟 2.克隆出来的动物个体和亲本完全一样吗? 【提示】 不完全一样。要受核基因、质基因和外界环境的影响。 核心要点突破 动物细胞的培养 1.动物细胞培养中相关概念 (1)贴壁生长:动物细胞在液体培养基中悬浮生长一段时间之后,大部分细胞会贴附在培养瓶的内壁生长。也有一些细胞(如淋巴细胞)能够持续在悬浮状态下生长,这些能长期悬浮生长的细胞容易进行大规模细胞培养,生产大量的动物细胞及其产物。 (2)接触抑制:大多数细胞不适应悬浮生长,它们必须在固体的表面上生长和分裂。细胞在培养瓶中贴壁生长,随着细胞数量越来越多,当贴壁生长的细胞分裂生长到表面相互接触时就停止分裂增殖,这种现象叫接触抑制。 2.动物细胞培养的几个注意点 (1)动物细胞培养的原理是细胞的增殖,其目的是获得细胞株或细胞系,其他动物细胞工程技术均建立在此基础之上。 (2)原代培养的材料一般取自动物胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织,因为这些器官或组织上的细胞生命力旺盛,分裂能力强。 (3)原代培养中用胰酶分散细胞是因为细胞之间有很多胶原纤维,但由于细胞膜的主要成分之一也是蛋白质,因此处理时间不可太长。把组织细胞分散开制成悬浮液,有利于营养物质的吸收和代谢废物的排出。 (4)原代培养能保持正常的二倍体核型。传代培养至50代左右时,部分细胞的核型发生变化,获得不死性,目前使用冷冻保存的正常细胞通常在10代以内。 例1
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