维生素分析与检验.ppt

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水溶性维生素的测试分析方法 分光光度法 分子荧光法 毛细管电泳法 高效液相色谱法 微生物法 脂溶性维生素的分析和检测 维生素C的检测方法 2,6-二氯靛酚滴定法 2,4-二硝基苯肼法 高效液相色谱法 钼蓝比色法 维生素B2的检测方法 分光光度法 催化动力学法 荧光法 色谱法 维生素分析与检验 维生素 又名维他命,是维持人体生命活动必需的一类有机物质,也是保持人体健康的重要活性物质 ⊙特点: ①维生素均以维生素原的形式存在于食物中 ②参与机体代谢的调节 ③大多数的维生素必须经常通过食物中获得 ④人体对维生素的需要量很小 ⊙重要性: 当体内维生素供给不足时,能引起身体新陈代谢的障碍,造成皮肤功能的障碍。 分类: 水溶性维生素: 维生素B族、维生素C、维生素PP、叶酸等 脂溶性维生素: 如维生素A、维生素D、维生素E、维生素K等  高效液相色谱法 色谱柱: symmetry C18 (319 mm ×150 mm, 5μm) 流动相:甲醇水(含己烷磺酸钠5 mmol/L、冰醋酸1%、三乙胺013%) = 25∶75 流速: 1 mL /min 检测波长: 275 nm 进样量: 10μL. 优点:制备样品简单 不受样品挥发度和热稳定性的限制 高效性 、高选择性、分析速度快 缺点:仪器复杂 价格昂贵 滴定法测VC含量--2,6-二氯靛酚滴定法 试剂:1%草酸,2%草酸,0.001mol/L 2,6—二氯酚靛酚 步骤:1.称4.0g新鲜样品——加5ml 2%草酸研磨——过滤到50ml容量瓶中——残渣用2%草酸提取——用1%草酸定容。 2. 吸取10ml滤液于三角瓶中用2,6—二氯酚靛酚滴定,记录所用滴定液体积。 3. 对照:于另一容量瓶内加35ml 2%草酸用1%草酸定容,取10ml进行滴定,记录体积。 VC含量(ug/100gFW) =100*(V1-V2)K V/W V3 式中,W:样品重 V1:滴定样品用滴定液ml数 V2:滴定对照用滴定液ml数 V3:滤液ml数 V:提取液总体积 K:1ml滴定液氧化VC毫克数 荧光法测VB2含量 双水相的高效萃取作用 简便快速,检出限和选择性得到优化。 丙酮形成的双水相萃取荧光测定VB2的方法要优于由乙醇形成的双水相 实验方法 方法1: 准确移取一定量的VB标准溶液于10 ml比色 管中,加入适量硫酸铵 ,3.O ml丙酮或乙醇。用水稀释 至刻度后振荡1.0min静置分层,移取上层清液于λex/λem =444/52lnm处测量荧光强度,同时做空白实验。 方法2: 准确移取适量VB2标准溶液(含VB2为m4)于带刻度的比色管中,加入一定量的盐及丙酮或乙醇,用水稀释至10 ml后振荡1.0min。静置分层.读取上层有机相体积,在λex/λem=444/52lnm处侧量其荧光强度,确定VB含量m2,用式E=m1/m2计算有机相对VB的萃取率E。 植物维生素提取 以蒲菜为例 维生素C的提取 称取蒲菜15~20 g加4%偏磷酸25mL进行匀浆,匀浆后用2%偏磷酸定容至100mL,过滤,滤液进行维生素C含量的测定. 盐酸硫胺、核黄素(维生素B2) 、盐酸吡哆辛、烟酸、烟酰胺的提取 称取蒲菜15~20 g,加入75mL 011mol/LHCl于121℃加压水解提取30min,冷却后定容至100mL,过滤,滤液进行除维生素C以外的其它水溶性维生素含量的测定. 可见/近红外漫反射光谱无损检测南方蜜橘维生素C的研究 原理:利用光在生物组织内部具有反射、折射、衍射和吸收等特性来确定固体样品内部品质的一种快速分析法,在水果内外部品质无损检测中已得到广泛应用。对粉末及水果VC的检测也有相关报道。 缺点:需要化学处理,分析速度慢。 实验仪器及参数设置 选用美国ASD公司的QualitySpec光谱仪,其波长范围为350-1800nm,光谱采样间隔1nm,扫描时间每次100ms,扫描10次,光源为12V/45 W钨卤灯。 50个小果系蜜橘样品。经代表性样品选择,确定40个建模样品进行定标与验证,10个未知样品进行外部验证。标准化学值测定参照食品卫生检验方法理化部分总则(GB/T5009.1-2003),常规化学分析采用国家标准发中的2.6-二氯靛酚滴定法(GB/T6195--86)。 实验采用漫反射方式,每个样品在赤道部位灯间隔采集3次光谱,取平均值。光谱采集时尽量避免擦伤或伤疤灯缺陷部位 光谱数据由美国ASD公司的indico V4.0软件进行

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