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液相色谱基本原理与应用 主讲人:张伟 主要内容 1、液相色谱定义; 2、仪器结构与原理; 3、主要应用领域介绍; 4、生产液相色谱仪器的厂家。 一、液相色谱定义 高效液相色谱是在经典液相色谱基础上,引入了气相色谱的理论,在技术上采用了高压泵、高效固定相和高灵敏度检测器,因而具备速度快、效率高、灵敏度高、操作自动化的特点。 1.高效液相色谱法与气相色谱法 (1)气相色谱法分析对象只限于分析气体和沸点较低的化合物,它们仅占有机物总数的20%。对于占有机物总数近80%的那些高沸点、热稳定性差、摩尔质量大的物质,目前主要采用高效液相色谱法进行分离和分析。 (2)气相色谱采用流动相是惰性气体,它对组分没有亲和力,即不产生相互作用力,仅起运载作用。而高效液相色谱法中流动相可选用不同极性的液体,选择余地大,它对组分可产生一定亲和力,并参与固定相对组分作用的剧烈竞争。因此,流动相对分离起很大作用,相当于增加了一个控制和改进分离条件的参数,这为选择最佳分离条件提供了极大方便。 (3)气相色谱一般都在较高温度下进行的,而高效液相色谱法则经常可在室温条件下工作。 二、仪器结构与原理 高效液相色谱仪一般可分为4个主要部分: 高压输液系统 进样系统 分离系统 检测系统 1.高压输液系统 2.进样系统 3.分离系统 色谱柱 柱温箱 4.检测系统 紫外检测器 二极管阵列检测器 荧光检测器 示差折光检测器 蒸发光散射检测器 质谱检测器等等 三、HPLC在各领域的主要应用 环境:常见多环芳烃、多氯联苯、硝基化合物、酚类化合物、邻苯二甲酸脂、有机农药等。 农业:土壤矿物成分、肥料、饲料添加剂、茶叶等农产品中无机和有机成分等。 食品:有机酸、氨基酸、糖、维生素、脂肪酸、香料、甜味剂、防腐剂、人工色素、病原微生物、霉菌毒素、多核芳烃等。 材料:液晶材料、合成高分子材料等。 化工:无机化工产品、合成高分子化合物、表面活性剂、洗涤剂成分、化妆品、染料等。 生物:氨基酸、多肽、蛋白质、核糖核酸、生物胺、多糖、酶、天然高分子化合物等。 医药:人体化学成分、各类合成药物成分、各种天然植物和动物药物化学成分等。 1.环境保护 HPLC 已在环境监测中得到广泛应用, 特别适用于分子量大、挥发性低、热稳定性差的有机污染物的分离和分析。 例如多环芳烃(PAHs)、邻苯二甲酸酯类(PAEs)、酚类、多环联苯、联苯胺类、阴离子表面活性剂、有机农药、除草剂等。 多环芳烃(PAHs) 目前世界上公认的多环芳烃类物质为萘、蒽、菲、苯并a芘等16项,特别是苯并a芘是强致癌物质,其广泛存在于大气飘尘、水、土壤、生物等环境中, 严重影响身体健康。 可能含有多环芳香烃的材料: 电线,插头,塑料手柄,塑料包装箱,橡胶手柄,有异味塑料,橡胶产品。在电子电器制造业中, PAHs 通常是作为塑料添加剂进入生产环节中,如塑料粒子在挤塑的时候,和模具之间存在黏着,此时要加入脱膜剂,而脱膜剂中可能含有 PAHs 。 多环芳烃标准品色谱图 邻苯二甲酸酯类化合物(PAEs) 邻苯二甲酸酯类化合物的测定在全球主要工业国的生态环境中已达到了普遍检出的程度。它在环境中残留期较长, 生物对邻苯二甲酸酯有较强的富集作用。一旦进入自然生态系统中, 对其健康带来的危害是无法估计的。 欧盟将邻苯二甲酸丁基苄基酯( BBP) 、邻苯二甲酸二正丁酯( DBP) 、邻苯二甲酸二异辛酯( DEHP) 、邻苯二甲酸二正辛酯( DNOP) 、邻苯二甲酸二异壬酯(DINP) 、邻苯二甲酸二异葵酯( DIDP) 6 种PAEs 列为优先控制的有毒污染物。 主要存在于:玩具、食品包装材料、医用血袋和胶管、聚乙烯地板和壁纸、清洁剂、润滑油、个人护理用品(如指甲油、头发喷雾剂、香皂和洗发液)等数百种产品中。 邻苯6P标准色谱图 邻苯16P标准色谱图 多溴联苯醚 是一种添加型高效阻燃剂,由于其含溴量高,热稳定性好,添加量少,因而被广泛用于高分子塑料的阻燃。 十溴联苯醚的热稳定性非常好,适用于要求加工温度高的聚合物。可用作聚乙烯,聚丙烯,ABS树脂,聚苯醚,聚碳酸酯,聚氨酯,聚氯乙烯,环氧树脂,PBT,PET,硅橡胶和三元乙丙橡胶等的阻燃剂,被广泛用于橡胶运输带,石油加工,工业橡胶制品的阻燃添加剂。 多溴联苯醚标准品谱图 农药和除草剂 随着农业生产的发展和科学技术的进步, 人们为了获得农业丰收, 化肥、农药、除草剂等的使用量也日益增加,甚至在高尔夫球场、足球场等也
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