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课件:第九章肠杆菌科.ppt
3.V因子需要试验: 挑取可疑菌落接种兔鲜血平板或2%月示胨琼脂平板,再用金黄色葡萄球菌点种或垂直划线,置5-10% CO2 37℃培养,由于金色葡萄球菌在生长过程中可合成V因子,并在培养基中扩散,所以愈靠近金葡萄菌的嗜血杆菌菌落越大,越远越小,甚至不生长,该现象叫“卫星现象”。 4.生化试验:所有培养基中加入x和V因子。 六、泰勒菌属 仅有马生殖道泰勒菌属1种(过去叫马生殖道嗜血杆菌),致马 接触性子宫炎,通过交配传染。 第三节 弧菌科(此部分内容仅作参考) 科特征:G-,直或弯曲,兼性厌氧,无芽孢,化能异养,运 动着端鞭毛,氧化酶+主要存于水中,引起水产动物及人的病感菌。 弧菌属:引起人及动物疾病 气单胞菌属: 分类: 邻单胞菌属 发光杆菌属 水杆菌属 一、弧菌属 1.霍乱弧菌:引起霍乱,是人类的烈性传染病,对动物无致病。 2.副溶血弧菌:引起人类食物中毒,表现水样腹泻,呕吐及发。 3.鳗弧菌:引起鱼的口部及体表出血性溃疡,肌肉,鳍部局灶 性坏死及全身症状。 二、气单胞菌属 分类: 1 .嗜冷性非运动性气单胞菌:杀鲑气单胞菌及其亚种。 2 .嗜温性运动性气单胞菌:嗜水气单胞菌,温和气单胞菌,豚鼠气单胞菌,凡隆气单胞菌,舒伯特气单胞菌,简达气单胞菌,易损气单胞菌。 嗜水气单胞菌:引起水生动物败血症或皮肤溃疡等局部感染。人感染后引起急性胃肠炎。 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 2.致水肿病2型类志贺毒素(SLT-2e):是蛋白质性细菌毒素,用粗制的或纯化的SLT-2e静脉或腹腔注射适龄仔猪,可复制出水肿病,SLT-2e是致该病发生的主要毒素因子。 SLTEC的致病机理:以F18菌毛粘附于小肠上皮细胞,定居和繁殖的细菌在肠内产生SLT-2e并被吸收,造成细胞死亡和组织病变。另外,SLT-2e也是一种血管毒素,可引起血管内皮组织损伤,改变血管的通透性,导致猪出现水肿和典型的神经症状。神经症状是由脑水肿所致并非毒素对神经细胞直接作用。 (六)微生物诊断 1.取材:肠系膜淋巴结,心,肝,脾,涂片染色镜检:G-中等大小杆菌。 2.分离培养:接种麦康凯平板和血平板划线分离,挑取麦康凯 上的红色菌落或血平板上呈β溶血的菌落(仔猪黄痢与水肿病菌 株)进行以下生化实验。 3.三糖铁:斜面黄色/底部黄色,有气体产生。 4.接种普通肉汤:24~36h 均匀混浊,底部有粘稠沉淀,液面有菌环。 5.生化试验: G 蔗 麦 乳 IMViC ⊕ ⊕ ⊕ ⊕ + + - - 6.动物致病性试验:24h 肉汤培养小白鼠腹腔0.2-0.4ml, 24~48h小鼠死亡。 7.对ETEC各种粘附性抗原鉴定:应先将待检菌在粘附素专用培养基上培养。培养物用已知的各种粘附素单因子血清或克隆抗体作玻板凝集,或用免疫荧光,ELISA等作其它血清学方法鉴定,也可用MRH及其抑制试验MRHI以及体外肠上皮细胞吸附与吸附抑制试验加以鉴定。 8.对ETEC肠毒素的检测:①LT检测方法有 Y1小鼠肾上腺细胞或中国仓鼠卵巢细胞(CHO)培养法,平板免疫溶血试验,夹心红细胞免疫试验,夹心ELISA,兔回肠结扎试验,兔皮肤蓝斑试验法。②ST检测方法有乳鼠胃内投服试验GM1-ELISA。 9.对SLT-2e检测:用该毒素的粗提或纯化物作Vero细胞毒性试验和小鼠神经毒性试验,并以STI-2e血清或单抗作中和试验鉴定之。 (七)防治 1.以抗粘附毒素免疫为基础的含单价或多价菌毛抗原的灭活菌苗或亚单位苗。 2.以抗肠毒素免疫为主的类毒素苗或LI-B亚单位苗。 3.表达一种或两种粘附素的基因工程苗 K88 K99双价基因工程苗。 二、沙门氏菌属 沙门氏菌属是肠杆菌科一个大属,有2500多个血清型,寄生于人及动物肠道,引起各种疾病。 (一)形态染色特征 G-中等大小杆菌,除鸡白痢和鸡伤寒沙门氏菌外,都有鞭毛,能运动,无芽胞,无荚膜。 (二)培养特性 麦康凯平板:无色菌落, 伊红美蓝琼脂:无色(大肠杆菌黑色带金属光泽) 运腾氏:无色(大肠杆菌为红色带金属闪光菌落)。 (三)生化特性: 三糖铁斜面:斜面红色/底部黄色(若有H2S产生,底部为黑色) 5生化试验: G 蔗 麦 乳 IMViC ⊕ - ⊕ - - + - + (四)抗原及变异 具有O,H,K和菌毛4种抗原。O和H抗原是其主要抗原,构成 血清型鉴定的物质基础。 1.O抗原:细胞壁表面的耐
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