2-2动物细胞工程2.ppt

植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 * * * 复习提问: 1、比较动物细胞和植物细胞培养？ 2、比较原代培养和传代培养？ 3、比较细胞株和细胞系细胞的特点？ 一、动物细胞融合 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 1.概念： 2.结果： 3.原理： 4.诱导 方式 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 形成单核的杂交细胞 细胞膜的流动性 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 常用的灭活的病毒有： 思考讨论：为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？ 灭活的仙台病毒、 灭活的疱疹病毒 5.过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 1个完整的杂交细胞AB 　　注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞 6.意义： 　　突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7. 应用： 　　成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 　　特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 1.什么是抗体？ 2.抗体是由何种细胞产生的？ 抗体是具有免疫作用的蛋白质。 受抗原刺激后，B淋巴细胞分化形成的浆细胞可以产生抗体。 二、单克隆抗体 B淋巴细胞与抗体的关系： 　1、动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　2、每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。 　　传统的抗体生产方法及缺陷是什么？怎样解决这个问题？ 常规抗体的缺陷 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 抗原不纯 抗体不纯 筛选单一浆细胞 特异性差、纯度低； 产量低、反应不够灵敏 不能增殖产生大量抗体 抗原 一、单克隆抗体的概念 　　由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 2、怎样才能获得单克隆抗体？ 提示1：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示2：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 设计方案： 一个B淋巴细胞 　　　——只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞 　　　——能无限增殖 杂交细胞 2、怎样才能获得单克隆抗体？ 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选,继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 单克隆抗体 单克隆抗体制备过程 体外培养 注射到小鼠腹腔 1. 原理： 　　杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能产生足够数量的单一抗体。 诱导融合 2. 过程 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 B-B细胞 B-瘤细胞 瘤-瘤细胞 选择培养 杂交瘤细胞(B-瘤细胞) 克隆化培养 抗体检测 杂交瘤细胞 体外培养 小鼠腹腔内增殖 单克隆抗体 三、单克隆抗体的应用 单克隆抗体的优点：特异性强、灵敏度高 2.用于 运载药物：制成“生物导弹” 治疗疾病：主要用于癌症治疗 优点：准确、高效、简易、快速 优点：疗效高、毒副作用小 1.作为诊断试剂：准确识别各种抗原物 质，并与抗原特异性结合 制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法（同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去除细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 * *