第一章 血液标本采集和血涂片制备.ppt

第一章 血液标本采集和血涂片制备 重点：血标本采集方法和血涂片制备技术 难点：各种抗凝剂的优缺点和使用选择 第一节 血液标本采集和抗凝剂选择 血标本： 全血：血细胞+血浆;临床血液学检查，血细胞计数、分类和形态 学检查 血浆：全血除去血细胞；血浆病理性和生理性化学成分的测定，内分泌激素、凝血因子（钙除外）、血栓和止血检查 血清：离体后血液自然凝固后析出的液体成分（除纤维蛋白原等凝血因子）；临床化学和临床免疫学检查 一、采血方法 静脉采血法 部位：主要是肘静脉。还可以在：手背、内踝、股静脉，幼儿可采用颈外静脉采血 采血器材：一次性注射器 采血步骤和注意事项：止血带压迫时间不能过长；注射器和容器必须干燥 部位：中指或无名指尖内侧、耳垂；半岁以下拇指或足部，特殊人员视情况而定 所用器材：采血针、吸管 采血步骤及注意事项：避免交叉应严格实行一人一针制；穿刺的深度的适当，切忌用力挤压，以免混入组织液，影响检验结果。 部位：主要是肘静脉。 采血器材：真空采血装置，头套式、头皮静脉式两种 采血步骤及注意事项：利用真空贮血管中的负压原理，自动定量的将血液引入贮血管内；瓶塞穿刺针外具有止血护套，使用时请勿将其取下；采集血样后，针对有输液要求的病患者，医务人员可将软座与输液器相接进行输液，减少病人的静脉穿刺次数；一次性使用，用后销毁。 既有利于标本的收集运送和保存，又便于防止血液交叉感染，已开始在国内推广使用。 方法学评价 静脉采血 皮肤采血 真空采血 缺点 不同抗凝剂的使用， 限制了重复实验； 价格高 改变血液性质，影 易于溶血、凝血 响有形成分的形态; 和可混入组织液 环境污染 优点 标本代表性大，无 价廉、快速、操作 减少溶血，操 组织液影响，适于 简便，标本可直接 作规范，防止 临床研究，可重复 测定 交叉感染，保 实验和追加其他实 护环境 验 质量控制 患者：活动情况、精神状态、药物、年龄、性别标本采集等 采血：操作规范 溶血：采集、转移、保管、分离 血标本处理：立即送检 实验结果分析：药物、饮食的影响；密切结合临床 二、抗凝剂选择 抗凝：用物理或化学方法除去或抑制血液中的某些凝血因子的活性，以阻止血液凝固 抗凝剂：能够阻止血液凝固的物质，称抗凝剂 乙二胺四乙酸（EDTA）盐 抗凝原理：螯合钙离子 使用方法：15g/L浓度EDTA 和血液 1：10 适用范围：对血细胞形态、血小板计数影响小；影响血小 板聚集和白细胞吞噬功能；不适合做凝血象检验及血小板功能试验 草酸盐 （sodium oxalate） 草酸钠 、草酸钾、草酸铵 原理：草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀，从而阻止血液凝固 使用方法：草酸钠0.1mol/L 和血液1：9 适用范围： 凝血象检查 肝素（heparin） 原理：低浓度时抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之间的作用，加强抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）灭活丝氨酸蛋白酶，从而阻止凝血酶形成,还能抑制凝血酶的自我催化及抑制因子Ⅹ的作用；高浓度时阻断凝血酶和纤维蛋白的反应 适用方法： 1g/L浓度的肝素钠与血液 1：10 优点：抗凝能力强、不影响血细胞体积、不易溶血、能耐高温 适用范围：红细胞检验（红细胞计数、血红蛋白测定、红细胞比积）和多种生化分析 枸橼酸盐（枸橼酸三钠） 原理：螯合钙离子 使用方法：配成109 mmol/L的浓度和血液1：9 106 mmol/L的浓度和血液1：4 适用范围：止血学检验、血沉、输血保养液（毒性小） 物理方法抗凝 脱纤维蛋白：将血液注入有玻璃珠的器皿中，转动，纤维蛋白缠绕凝固于玻璃球，从而防止血成凝块。适用于免疫学检验和红斑性狼疮细胞检查。 血液的贮存 1. 血液标本检验前的预处理 分离血清或血浆 预温血浆或血清 分离细胞 冷藏保存:血浆在4℃保存24h后，某些凝血因子活性减少95%。供血细胞分析仪使用的EDTA-k2抗凝全血应保存于室温，但不宜超过8h，如果在4℃保存可使血小板计数结果减低。