核盘菌一分支酸变位酶同源效应蛋白的亚细胞定位.pdf

　 犘犾犪狀狋犘狉狅狋犲犮狋犻狅狀 研 究 报 告 犚犲狊犲犪狉犮犺犚犲狅狉狋狊 狆 核盘菌一分支酸变位酶同源效应蛋白的亚细胞定位 ， １ １ １２ １ 盛寅生 ， 任爱芝 ， 常 雪 ， 赵培宝 　 　 　 　 （ 聊城大学植物保护系，聊城 ； 山东省聊城市林业局，聊城 ） １． ２５２０００ ２． ２５２０００ 　 　 摘要 前期研究表明核盘菌犛犮犾犲狉狅狋犻狀犻犪狊犮犾犲狉狅狋犻狅狉狌犿产生的一种分支酸变位酶同源效应蛋白能够提高其致病能力。 　 为了进一步研究该效应蛋白在核盘菌致病过程中的作用机制，我们通过构建ＧＦＰ融合蛋白对其分泌行为和亚细胞 定位开展了研究。首先通过 技术扩增了该基因的启动区 信号肽（ ） 叶绿体定位肽（ ）的 序列， ＰＣＲ ＋ ＳＰ＋ ＣＴＰ ＤＮＡ 构建ＧＦＰ融合载体，然后借助ＲＥＭＩ技术转化核盘菌原生质体，筛选ＧＦＰ能够表达的转化子，最后接种转化子菌 丝于烟草叶片，激光共聚焦检测ＧＦＰ荧光信号，发现ＧＦＰ荧光与叶绿体自体荧光共定位，表明该效应蛋白可分泌 进入寄主叶绿体内发挥作用。 关键词 菌核病； 效应子； 启动子； 信号肽； 叶绿体定位肽 　 　 　 　 　 中图分类号： 文献标识码： ： ／ Ｓ４３２．４４ Ａ 犇犗犐 １０．１６６８８．ｚｗｂｈ．２０１８０２５ 　 　　 　 　　 　 ｊ 犛狌犫犮犲犾犾狌犾犪狉犾狅犮犪犾犻狕犪狋犻狅狀狅犳犪狀犲犳犳犲犮狋狅狉犺狅犿狅犾狅狅狌狊狑犻狋犺犮犺狅狉犻狊犿犪狋犲 犵 犿狌狋犪狊犲犻狀犛犮犾犲狉狅狋犻狀犻犪狊犮犾犲狉狅狋犻狅狉狌犿 ， １ １ １２ １ ， ， ， 犛犎犈犖犌犢犻狀狊犺犲狀 犚犈犖犃犻狕犺犻 犆犎犃犖犌犡狌犲 犣犎犃犗犘犲犻犫犪狅 犵 　 　 　 （ ， ， ， ； １．犇犲犪狉狋犿犲狀狋狅犘犾犪狀狋犘狉狅狋犲犮狋犻狅狀 犔犻犪狅犮犺犲狀犝狀犻狏犲狉狊犻狋 犔犻犪狅犮犺犲狀 ２５２０００ 犆犺犻狀犪 狆 犳 犵 狔 犵　 ， ， ） ２．犔犻犪狅犮犺犲狀犉