生物实验一：《检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质》.pptVIP

* * 一.实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如： ①.还原性糖的鉴定： 还原性糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 ②.脂肪的鉴定： 　　　 脂肪 + 苏丹Ⅲ 橘黄色 脂肪 + 苏丹Ⅳ 　 红色　　 ③.蛋白质的鉴定： 蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色 ④.淀粉的鉴定： 淀粉 + 碘液 蓝色 二.目的要求： 尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 1、还原糖的检测和观察： 选材 （1）含糖量高； （2）颜色为白色或接近白色的植物组织 以苹果.梨为最好。 问题：西瓜可以吗？ 制备组织样液：研磨成浆：取苹果洗净、去皮、切块，取5g 放入研钵，加石英砂、5 ml水研磨、过滤 三.实验过程: 可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，说明植物组织样液中含有还原糖。 注入2mL苹果组织样液 注入1mL刚配制好的斐林试剂 水浴加热约2min 呈色反应 变成砖红色 50----650C的温水 结论： 甲乙液等量混匀 振荡、混合摇匀呈现蓝色 ①还原糖有 。 ②试剂： . （甲液：0.1g/ml 的 , 乙液：0.05g/ml的 .） 甲乙液必须 后再加入样 液中， 。 ③必须 。 葡萄糖，果糖，麦芽糖 用水浴加热 斐林试剂 NaOH CuSO4 等量混合均匀 现配现用 注意事项： ④颜色变化： 浅蓝色 棕色 砖红色 2、脂肪的检测和观察： 圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。 取材： 花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片 制片 ①取最理想的薄片 ②在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液（3min） ③去浮色（用50﹪酒精） ④ 制成临时装片 观察 低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒， 然后用高倍镜观察 结论： 注意事项： ①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。 ②酒精的作用是： 。 ③需使用显微镜观察 ④ 使用不同的染色剂染色时间不同 颜色变化： 。 洗去浮色 橘黄色或红色 3、蛋白质的检测和观察： 选材 应该选择含 丰富的豆浆或鸡蛋清溶液。（避免材料自身的颜色对 实验变化颜色的掩盖） 蛋白质 黄豆浆滤液或蛋清稀释液 制备组织样液 呈色反应 组织样液2mL 双缩脲试剂A液1mL 双缩脲试剂B液4滴 摇匀后变成紫色 结论： 说明组织样液中存在蛋白质。 （3）注意事项： ①试剂： （ A液：0.1g/ml的 ； B液： 0.01g/ml的 ） 先加 ，再加 。 B液要求量适中，否则多余 的B液将会与A液发生反应生 成Cu（OH）2显色而遮盖原有的颜色。 ② 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比 双缩脲试剂 A液1ml B液4滴 NaOH CuSO4 蛋白质的检测结果 ③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免 实验后粘住试管壁，不易洗刷 斐林试剂与双缩脲试剂的比较： A液:0.1g/mLNaOH B液:0.01g/mLCuSO4 甲液:0.1g/mLNaOH 乙液:0.05g/mLCuSO4 紫色物质生成 砖红色沉淀 先加A液，再加B液，不需加热 甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热 蛋白质 还原性糖 试剂组成 检验结果 试剂用法 检测对象 双缩脲试剂 斐林试剂 4、淀粉的检测和观察： 取材： 马铃薯匀浆 检测 组织样液2mL 碘液2滴 结论： 说明组织样液中存在淀粉。 注意： 常用材料：马铃薯 试剂： 。颜色变化： 。 碘液 变蓝 摇匀后变成蓝色 1.在下列四支试管中分别加入一些物质，甲试管:豆浆;乙试管:氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和