细胞培养室的设计精品课件.ppt

4、准备区 准备区用于配制培养液和有关培养用的液体等。应设有试剂柜、器械柜、实验台和上水道、电源等，配备的主要仪器设备有水纯化装置、天平、微波炉、pH计、抽气泵、电炉、培养分装器、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶等。 在有天平、pH计、磁力拌器等设备下完成制备以后，应在无菌操作台进行过滤除菌。液体制备直接关系组织细胞养的成败，因此必须严格无菌操作。 5、清洗区 清洗区用于洗刷所有细胞培养器皿等，在实验室的一侧应设置专用的洗涤水池，用来洗玻璃器皿，备有各种瓶刷、去污粉、肥皂、洗衣粉等，中央实验台还应配置小水槽，用来清小型玻璃器皿。 清洗区应配有柜子、加热器、蒸锅，洗刷器皿用的盆、桶等，有条件可配置玻器皿清洗机，此外还应配置落水架、干燥箱、超声波清洗器等。 清洗区地面应耐湿，设置地并排水良好 6、消毒灭菌区 直接或间接与细胞接触的物品均需消毒灭菌处理。消毒灭菌区主要用于培养液的灭和各种器具的消毒灭菌，应备有高压蒸汽灭菌锅、细菌过滤设备、电热干燥箱、消毒柜、排风火设备等。 清洗和消毒灭菌区应与其他区分开。 三、动物细胞培养室的规章制度 ①每次实验前必须充分预习，熟悉实验操作中主要步骤和环节，了解仪器的性能和操方法。 ②严禁将与实验无关的物品带人实验室。 ③除严格按规程进行无菌操作，要培养良好习惯以防染菌或污染环境，并做好必要的全防护。 实验前清洗双手，用75％酒精棉球擦手，用湿布擦净台面，必要时可用新洁尔灭(扎溴铵)溶液；进行接种操作时，要关闭门窗，以防空气对流，保持安静和良好秩序，尽量减少走动和说话，以防尘埃飞扬和唾沫飞溅；实验室内严禁吸烟和饮食；凡需进行培养的材料，应注明名称、接种日期及操作者姓名(或组别)，放在指定的培养箱中进行培养；带菌移液管、培养瓶、培养皿等器材，应置于专用盘、架，确定不再使用后，应立即投入消毒液中浸泡20min以上，或煮沸0.5 h，或进行蒸汽灭菌后再清洗；离开实验室前要用肥皂洗手；实验室中物品未经许可，不得携带出实验室。 ④爱护仪器、设备，认真按操作规程使用仪器、设备，并作好使用记录。 ⑤认真做好细胞培养实验记录，以了解细胞生长情况，清晰填写实验报告。 ⑥发行意外情况时，应立即报告，在相关管理人员指导下及时处理。 ⑦节约水、电、试剂，适量取用实验药品等耗材。 ⑧实验完毕清除杂物，认真清洗器皿、清理试剂、清洁台面、保养仪器，物品归类还原。 ⑨值日生负责打扫实验室卫生，关好水、电、门、窗，经相关管理人员检查实验室安全，方可离开实验室。 思考题 动物细胞培养实验室包括哪些主要区域，每个区域的主要功能是什么？ 细胞培养室的设计 教学目标 了解动物细胞培养室的区域划分原则 熟悉动物细胞培养室各区域的主要功能 掌握动物细胞分离培养的工作要求 掌握动物细胞培养室的规章制度 本次课主要内容 一、细胞培养室的设计 二、细胞培养室的功能分区 三、动物细胞培养室的规章制度 动物细胞培养室的实验对象是离体的组织和细胞，对致病微生物及病毒无抵抗力，有被污染的危险，因此，细胞培养室不同于其他实验室之处就是要保持无菌。 般来说，无菌条件并不是要花很多钱去创造一个很大的无菌区域，重要的是动物细胞培养室能够防尘和不设立通道。使用超净工作台是创造无菌条件的简便方法，能为局部提供无菌条件，很大程度上方便了组织细胞培养工作，并使一些常规实验室有可能用于进行细胞培养。 动物细胞培养实验室应具备进行无菌操作、培养、准备、清洗、消毒灭菌和储存等六方面的功能。各个操作区域最好分别设置于相连的各个房间，特别是无菌操作室最好能单独设置；如果各部门都安置在一个大实验室内，无菌操作区与清洗、消毒灭菌区应分别位于两端，而准备、储存和培养区位于此两区之间。 动物细胞培养室的各种工作区域具有不同的特性和用途，在进行相应的操作时，要严格遵守各区域的操作要求和规章制度。本项目主要介绍动物细胞培养室的规划和布局设置、各操作区域的功能、基本设施、设置要求、操作要求和注意事项。 细胞培养室 第一节 动物细胞培养室的设计 一、动物细胞培养室的规划 动物细胞培养是一种无菌技术，要求工作环境和条件必须保证无微生物和不受其他有害因素的影响。为防止微生物污染和有害因素的影响，动物细胞培养室要求环境清洁，空气清新、干燥、无尘。动物细胞培养实验室由准备区、清洗区、消毒灭菌区、无菌操作区、培养区和储存区6部分组成，这些区域的共同特点是房间要宽敞、明亮，地面要便于清洁、防滑，墙壁的质地光滑坚硬，仪器设备布局合理，方便操作，避免交叉干扰，陈设简洁，便于清扫。 1、洁净度和粉尘 洁净度是指洁净空气中空气含尘(包括微生物)量多少的程度。 粉尘是指悬浮在空气中的固体微粒，习惯上称尘、灰尘、尘埃、烟尘、粉末等。国际标准化组织规定，粒径小于75μm的固体悬