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放线菌的培养和形态观察.pdfVIP

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山 东 大 学 实 验 报 告 放线菌的培养和形态观察 胡雪芳 201300261033 【实验目的】 1. 了解和掌握放线菌培养基的特点和培养方法。 2. 学习并掌握观察放线菌形态的基本方法。 3. 掌握弗氏、白色或者青色链霉菌的形态特征。 4. 掌握放线菌菌落形态特征。 【实验原理】 1. 培养基——高氏 I号培养基 高氏 I 号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。 此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐,这些无 机盐可能相互作用而产生沉淀。因此,在混合培养基成分时,一般是 按配方的顺序依次溶解各成分,甚至有时还需要将二种或多种成分分 别灭菌,使用时再按比例混合。此外,合成培养基有的还要补加微量 元素,如高氏I 号培养基中的FeSO ·7H O 的量只有0.001%,因此在 4 2 配制培养基时需预先配成高浓度的FeSO ·7H O 贮备液,然后再按需 4 2 加入一定量到培养基中。可溶性淀粉的配制方法。 2. 放线菌 放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常 见放线菌大多能形成菌丝体,紧贴培养基表面或深入培养基内生长的 叫基内菌丝 ,简称“基丝”,基丝生长到一定阶段还能向空气中生长 出气生菌丝 ,简称“气丝”,并进一步分化产生孢子丝及孢子。 有 山 东 大 学 实 验 报 告 的放线菌只产生基丝而无 气丝。有的放线菌只产生 基丝而无气丝。孢子丝的 形态特征是放线菌的重要 鉴定指标。 在显微镜下直接观察时, 气丝在上层、基丝在下层, 气丝色暗,基丝较透明。孢 子丝依种类的不同,有直、 波曲、各种螺旋形或轮生。 图1. 孢子丝的形态 在油镜下观察,放线菌的孢 子有球形、椭圆、杆状或柱状。能否产生菌丝体及由菌丝体分化产生 的各种形态特征是放线菌分类鉴定的重要依据。 观察放线菌的形态特征的这些方法的主要目的是尽可能保持放线 菌自然生长状态下的形态特征。 3. 插片法/印片法观察放线菌 插片法:将放线菌划线接种在高氏I 号培养基琼脂平板上,扦插上 灭菌盖玻片后培养,使放线菌菌丝沿着培养基表面与盖玻片的交接处 生长而附着在盖玻片上。观察时,轻轻取出盖玻片,置于载玻片上直 接镜检。这种方法利于保持放线菌生长员态,观察放线菌自然生长状 态下的特征,而且便于观察不同生长期的形态。 印片法:取干净载玻片或者盖玻片在均苔表面轻压,使孢子丝和气 山 东 大 学 实 验 报 告 生菌丝以原始形态粘附在上面,主要观察孢子丝和孢子的形态特征。 【实验材料】 1. 菌株及其培养条件 表 1. 菌株。 编码 菌株 拉丁文 培养条件 1 弗氏链霉菌 Str

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