食品生物技术复习题完整答案版.doc

PAGE \* MERGEFORMAT PAGE \* MERGEFORMAT 1 一 基因工程与食品 名词解释 1.基因工程：是指将目的基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的技术。 2.限制酶：是一类能够识别双链DNA分子中某种特定核苷酸序列并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。 3.DNA连接酶：是一种能在ATP或NAD+存在下催化双链DNA片段紧靠在一起的3’羟基末端与5’磷酸基团末端之间形成磷酸二酯键，使两末端连接起来的酶。 4.DNA聚合酶：能够催化DNA复制和修复DNA分子损伤的一类酶，可在其催化下进行DNA体外合成反应 DNA修饰酶：这类酶能对DNA分子进行一些比如3’末端加dNTP或5’末端添加/脱除磷酸基团等等的修饰 T4噬菌体多核苷酸激酶：是一种能催化γ-磷酸从ATP分子转移给DNA或RNA分子的5’-OH末端的酶，它对底物分子长度没有限制。 5.碱性磷酸酶：这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成5’-OH末端 6.启动子：是指一段能被宿主RNA聚合酶特异性识别和结合并指导目的基因转录的DNA序列，是基因表达调控的重要元件。 8.终止子：是指一段终止RNA聚合酶转录的DNA序列，分为本征终止子和依赖终止信号的终止子。 11.克隆载体：是指能在细胞内进行自我复制的外源基因运载体，如细菌质粒、λ噬菌体、M13噬菌体及粘粒等。 12.质粒：是一些存在于微生物细胞染色体外的小型闭合环状双链DNA分子，是能够进行独立复制并保持恒定遗传的复制子。 13.穿梭质粒：是指一类由人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可在两种不同的寄主细胞中存活和复制，并可以携带外源DNA在不同物种的细胞间往返穿梭的质粒载体。 14.粘粒载体：是一类人工构建的含有λDNA粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。 15.噬菌粒：是指质粒载体与M13噬菌体的基因间隔区重组而成的噬菌体载体，同时具有二者的复制起点。 16.感受态细胞：是指具有能够接受外源DNA的生理状态的受体细胞，一般处于对数生长期后期，时间短暂，但经氯化钙等处理可使细胞进入这一状态。 17.转化：是指把带有目的基因的重组质粒DNA引入受体细胞的过程。 18.转染：是指将重组噬菌体DNA直接引入受体细胞的过程。 19.转导：是指将重组噬菌体DNA包装到噬菌体头部成为有感染力的噬菌体颗粒，再以此噬菌体为载体，将头部重组DNA导入受体细胞中。 20.化学转化法：对受体细胞经过氯化钙、氯化铷等化学试剂的处理，使细胞膜的通透性发生暂时性的改变从而使受体细胞进入感受态，再经过热击、冷冻等处理即可将外源DNA摄入。 21.电穿孔转化法：是指利用脉冲电场将DNA导入受体细胞的方法。 基因定点诱变：是在体外特异性地取代、插入或缺失DNA序列中任何一个特定碱基的技术,包括盒式取代诱变、寡核苷酸引物诱变及PCR定点诱变等 22.SD序列：Shine-Dalgarno序列，即核糖体结合位点，是指原核基因转录起始位点下游的一段DNA序列，它与核糖体16S rRNA特异配对而与宿主核糖体结合，对mRNA的翻译起决定性作用。 23. DNA体外重组：是指将目的基因（外源DNA片段）用DNA连接酶在体外连接到合适的载体DNA上形成重组DNA。 24.抗生素抗性基因插入失活法：载体的抗药性基因内具有限制酶的识别位点，用某种限制酶消化并再此位点插入外源DNA时，抗药性基因不再被表达，当这个重组载体转化宿主菌并在药物选择平板上培养时，根据对该药物由抗性转为敏感，便可筛选出重组转化子。 25.β-半乳糖苷酶基因插入失活法：质粒载体上LacZ基因编码的β-半乳糖苷酶N端与受体细菌编码的C端片段实现а互补而具有酶活性，可在IPTG诱导下分解生色底物X-gal并形成蓝色菌落，但当外源片段插入质粒的多克隆位点后，使β-半乳糖苷酶的N端失活从而破坏а互补，因此带有重组质粒的细菌将产生白色菌落，从而可依据菌落的颜色筛选出可能带有重组质粒的转化子菌落。 26.电镜R-环检测法：在分子杂交中，核酸探针与部分变性的双链DNA分子中的互补单链形成杂合双链，同时另一条单链向外突出，二者形成泡状体，即R环结构，可用电镜直接观察，从而可以检测双链DNA中是否含有目的序列。 问答题 基因工程载体必须满足哪些基本条件？ 能独立自主的复制 能便利的加以检测 都能容易进入宿主细胞中去，也易从宿主细胞中分离纯化出来。 质粒载体有什么特征，有哪些主要类型？ 特征： (1)染色体外的双链环状DNA分子 (2)大小为1～200kb； (3)能独立于染色体外进行自我复制，每个细胞中可含10～200个