细胞工程-第1章-mdf.ppt

动物细胞培养室 植物细胞培养室 超净工作台的原理 荧光倒置相差显微镜 荧光倒置相差显微镜，其照明系统位于镜体上方，而物镜和目镜则位于下部。在集光器和载物台之间有较大的工作 距离，可以放置培养皿 和细胞培养瓶等容器， 辅助以相差和荧光光学 系统，可以很方便地对 培养或染色中的细胞和 组织进行观察。 灭菌锅 手动移液器具 生物安全防护水平（BSL） 由一级防护屏障（安全设备）和二级防护屏障（实验室设施）组合构成四级生物安全水平 。 一级生物安全防护水平（BSL－1）P1 二级生物安全防护水平（BSL－2）P2 三级生物安全防护水平（BSL－3）P3 四级生物安全防护水平（BSL－4）P4 二、 动物细胞工程实验室常用设备 CO2培养箱 CO2培养箱 CO2培养箱设定的条件为37 ℃ ，5％CO2 。 使用CO2培养箱培养细胞时应注意的问题： ① 用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶盖微松，以保证通气。 ② 保持培养箱内空气干净。 定期消毒（90 ℃ ，14 h)。 ③ 箱内灭菌蒸馏水3000毫升蒸馏水槽中以保持箱内湿度，避免培养液蒸发。 显微操作仪 显微操作法进行细胞核移植 细胞电融合仪 细胞冷冻储存器 ——液氮罐 液氮温度：-196℃ 不断挥发，及时补充 培养用器皿 玻璃器皿 塑料器皿 培养瓶 培养皿 培养板 多孔培养板 4、6、24、96孔 培养皿 30、60、100毫米 培养瓶 500毫升、250毫升、100毫升 培 养 板 手术器械 主要用于动物组织取材、解剖 器 械 解剖刀 解剖剪 虹膜剪 镊子 注意保护刀锋，钝刀对组织有伤害，不利细胞生长 三、植物细胞工程实验室常用设备 光照培养箱 人工气候室 摇 床 培养瓶 实验室的生物安全 PROTECT biosafety level * * Chapter 1  细胞培养的设施与基本条件 ◆ 1.1细胞工程实验室的设置 ◆ 1.2 常用仪器与设备 ◆ 1.3 实验室的生物安全 细胞工程实验室设计 原则 防止微生物污染和有害因素影响 要求 工作环境清洁、空气清新、干燥和无烟尘； 划分不同功能区或用铝合金隔板隔开； 无菌操作区应在室内较少走动的内侧； 清洗和消毒安置在另室； ◆ 1.1.1动物细胞培养室的设置 过道 ◆1.1.2 植物细胞培养室的设置 过道 ◆ 温度：一般控制在25±2oC ◆ 光照：光强、光质、光照时间 1.2 常用仪器与设备 一、 动植物细胞工程实验室通用仪器设备 超净工作台 超净工作台的工作原理是利用鼓风机驱动空气通过高效滤器除去空气中的尘埃颗粒，使空气得到净化。净化空气徐徐通过工作台面，使工作台内构成无菌环境。 超净工作台的原理 倒置显微镜 水纯化装置 自动双重纯水蒸馏器 超纯水器 冰 箱 ■ 普通冰箱 （4℃，－20 ℃ ） ■ 低温冰箱（－20 ℃ ） ■ 超低温冰箱（－80 ℃ ） 电热干燥箱 ■干热灭菌和烘干玻璃器皿 ■ 100度以下时再打开箱门 ■ 金属器械、塑料制品、橡胶等不能在干燥箱内消毒 压力蒸汽消毒器 用途：湿热灭菌 真空灭菌锅 高压灭菌锅 过滤除菌装置 细胞计数板或计数仪 其它常用仪器设备 ◆ 离心机和离心管 ◆ 移液管和吸管 ◆ 移液器 ◆ 天平等 ◆酶标仪 离心机