生化SOP标准操作程序.doc

井陉县医院检验科SOP标准操作程序 SOP标准操作程序 ALT/GPT 丙氨酸氨基转移酶试剂盒 临床意义： 本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中丙氨酸氨基转移酶的活力。 临床上，有许多疾病会导致血清中丙氨酸氨基转移酶活力增高。如肝胆类疾病：包括传染性肝炎、肝癌、肝硬变活动期、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎；心血管疾病：包括心肌梗塞、心肌炎、脑出血等。一些药物和毒物也可以引起ALT活性升高：如氯丙嗪、异烟肼、奎宁、酒精、铅、汞、有机磷等。 因此，血清丙氨酸氨基转移酶活力的测定可用于这些致病的诊断和监测，特别是用于肝胆类疾病的诊断和肝功能检测。 方法原理： 上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒以IFCC1（国际临床化学委员会）推荐法为基础设计，采用两步法测定： 丙氨酸氨基转移酶 L-丙氨酸 + α-酮戊二酸 -----------------------→ 丙酮酸 + L-谷氨酸 乳酸脱氢酶 丙酮酸 + β-NADH + H+ ---------------→L-乳酸 + H2O + NAD+ 底物L-丙氨酸和α-酮戊二酸在丙氨酸氨基转移酶催化下,生成丙酮酸和L-谷氨酸.其中丙酮酸在乳酸脱氢酶的催化下,生成了L-乳酸,并同时引起了β-NADH的氧化,使波长340nm处的吸光度下降. 在一定底物浓度范围内,β-NADH的氧化所引起的340nm处吸光度的下降速率与血清中丙氨酸氨基转移酶活力成正比。 样本： 病人准备： 应空腹取血。 样本类型： 新鲜无溶血现象的血清或EDTA抗凝血浆。 最少样品量：0.2ml。 样本稳定性：血清中的ALT在2～8℃可稳定7天，不推荐使用冰冻保存的样本2。 仪器与试剂: 仪 器：东芝120生化分析仪 试 剂：上海科华生物工程股份有限公司的丙氨酸氨基转移酶试剂盒 试剂准备：丙氨酸氨基转移酶试剂盒为即开即用的液体双剂型，无需特殊准备。试验用试管的直径在12～16mm。 试剂组份： 参见试剂盒内说明书。 注意事项： 1.此试剂为体外诊断用。 2.试剂有毒，不要入口，吞下有害，如误服（包括内部接触）应立即寻求医疗保护。避免试剂和眼睛，皮肤及粘膜接触，如不慎接触（外部接触）应用大量的水冲洗受损害的部位, 如仍有不适，应前往医院诊治。 3.试剂中含有叠氮钠，可与下水管中的铜反应形成爆炸性化合物，如果排向下水道请用大量的水冲洗。 性能参数： 1.精密度（重复性）： 批内变异系数≤5%； 批间相对极差 ≤6%。 2.准确度： 相对偏差≤15％。 3.病人结果可报告范围（线性范围）： 0～1000U/L（37℃）。 4.分析特异性（抗干扰能力）： 本液体试剂以IFCC推荐法为基础设计，采用二步法，可防止胆红素的干扰。 5.稳定性： 试剂在2～8℃避光保存，有效期为1年； 试剂开启后在2～8℃避光保存，可稳定30天。 变质指示： 如试剂混浊，或以蒸馏水为空白，试剂工作液在340nm处吸光度小于1.0，请勿使用。 校准： 使用生理盐水(蒸馏水)和理论K因素进行校准，或者使用生理盐水(蒸馏水)和其它质量可靠的校准血清进行二点校准。 质控： 至少2个浓度水平的质控品。 操作程序： 东芝120开机 装载试剂 输入参数 实施校准 加载样本 和仪器有关的操作程序请参照东芝120用户手册。 计算： 无需手工计算，在37℃每个样本的结果自动以U/L打印。 报告结果: 参考范围： 血清和血浆：8～40U/L（37℃）。 参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。每个实验室应建立自己的参考值。 不正常结果的处理程序： 根据仪器参数的正常值会打印异常标志。 报告格式： 自动地打印37℃U/L的报告，如果以SI单位（uKat/L）报告结果，要乘以0.017。 操作过程注意事项： 操作过程的限制性： 丙氨酸氨基转移酶试剂盒的线性范围是0～1000U/L。样品浓度超过线性上限应稀释重做。如在东芝120中应用自动重做功能，标本稀释重做后会自动乘以稀释倍数。超范围的标本也可以用生理盐水稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数，东芝120可以应用自动重做功能自动重作超范围的标本。 参考文献： 1. Expert Panel on Enzyme . Scientific Committee.International Federation of Clinical Chemistry:IFCC Methods for alanine aminotransferase(stage 2,Draft 1979-11-19). Clin . Chem .Acta. 147F-172F(1980). 2. 叶应妩，王毓三；全国临床检验操作规程（第三版） Young,D.S.,Effects of Drugs o