雷公藤甲素对变应性鼻炎大鼠iNOS和Eotaxin及NFκB影响的研究-耳鼻咽喉科学专业论文.docxVIP

郑州大学2007届硕士研究生毕业论文 郑州大学2007届硕士研究生毕业论文 雷公藤甲素对变应性鼻炎丈鼠iNos和Eotaxltl及NF-r,B影响的研究 TP、DM和SC在激发前30分钟腹腔注射和鼻腔滴入。模型成功后，10％水合 氯醛腹腔内注射麻醉，心脏放血法处死大鼠，取各组大鼠鼻粘膜组织，4％多聚 甲醛固定，石蜡包埋，制成4-61am切片，用多聚赖氨酸处理玻片，粘铺切片。 对各组鼻粘膜组织切片分别行HE染色和甲苯胺蓝染色以进行病理观察；用免疫 组化技术观察鼻粘膜组织iNOS、Eotaxin以及NF．r,B的表达情况，光镜下任选5 个视野，计算机图象分析阳性区的灰度值，计算其平均值作为该片的代表值。实 验数据采用统计软件包SPSSll．0，统计学分析采用单因素方差分析并继以最小 显著差(LSD)t检验比较组间差异，相关分析采用直线相关分析法。 结果 (1)动物行为观察：OVA致敏组大鼠烦躁不安、鼻瘁、喷嚏、流涕症状明显； TP处理组和DM处理组少量模型动物有轻微症状，神智安静；SC组动物未见上 述症状。 (2)鼻粘膜HE染色镜下观察：OVA致敏组大鼠鼻粘膜肿胀增厚，腺腔及小 血管管腔扩张，杯状细胞增多。在粘膜及粘膜下层，小血管及腺体周围，有大量 炎性细胞浸润；TP处理组和DM处理组炎症表现较轻；sc组无明显炎症表现。 EOS计数：OVA致敏组：9．10士-0．76；TP处理组：3．93+0．51；DM处理组：4．014-0．59： SC组：0．52a：0．43；OVA致敏组鼻粘膜嗜酸性粒细胞细胞数较SC组显著升高 (PO．0D。TP和DM组可显著降低致敏大鼠鼻粘膜嗜酸性粒细胞的细胞数 (p(O．01)。 (3)鼻粘膜甲苯胺蓝染色镜下观察：OVA致敏组大鼠鼻粘膜肿胀增厚，腺腔 及小血管扩张，在粘膜及粘膜下层可见肥大细胞沿血管壁广泛浸润。11P处理组 和DM处理组病理改变较OVA组减轻；SC组仅见少量肥大细胞沿着小血管壁 散在分布。肥大细胞计数：OVA致敏组：22．71=1=1．20；TP处理组：11．28=1=1．36； DM处理组：10．73+0．81；SC组：1．35-a：0．76；OVA致敏组鼻粘膜肥大细胞细胞 数较SC组显著升高(PO．01)。TP和DM组可显著降低致敏大鼠鼻粘膜肥大细胞 的细胞数fPO．01)。 (4)免疫组化检测结果：①鼻粘膜组织中iNOS的检测结果：iNOS主要表达 于上皮、腺体、血管内皮、平滑肌和炎性细胞中，胞浆着色，呈棕黄色。鼻粘膜 组织中iNOS阳性区的灰度值为：OVA致敏组：92．41+12．23；TP处理组： H 郑州大学2007届硕士研究生毕业论文 郑州大学2007届硕士研究生毕业论文 雷公藤甲素对变应性鼻灸大鼠订峨和E(xaxin及NF-r,B影响的研究 53．54士5．60；DM处理组：59．32A：9．50；SC组：37．54j：6．02。②鼻粘膜组织中Eotaxin 的检测结果：Eotaxin主要表达于上皮细胞、腺体细胞和一些炎性细胞中，胞浆 着色，呈棕黄色。鼻粘膜组织中Eotaxin阳性区的灰度值为：OVA致敏组： 98．23j：11．23：TP处理组：55．21+8．26；DM处理组：58．734-10．65；SC组：38．36-3=5．89。 ③鼻粘膜组织中NF-r．B的检测结果：NF-r．B主要表达于鼻粘膜组织上皮细胞、 腺体细胞和血管周围的炎性细胞，胞浆、胞核均着色，呈棕黄色。鼻粘膜组织中 NF-r,B阳性区的灰度值为：OVA致敏组：97．10：l：11．16；TP处理组：60．08-4：6．47； DM处理组：64．48=1=10．13；SC组：38．75-J：7．47。iNOS、Eotaxin和NForB中，OVA 致敏组或SC组与其它三组比较均有统计学意义(PO．01)；TP处理组和DM处理 组比较无统计学意义(尸0．05)。 (5)相关性分析：OVA致敏组大鼠鼻粘膜组织中iNOS的表达强度与Eotaxin 的表达强度里强烈正相关(间．886,P0．01)；OVA致敏组大鼠鼻粘膜组织中 NF．r．B的表达强度与iNOS、Eotaxin的表达强度呈强烈正相关(严O．818，r=0．908， P0．01)。 结论 (1)TP对OVA致敏的变应性鼻炎大鼠模型症状有明显的控制效果。 (2)TP可显著降低变应性鼻炎大鼠模型鼻粘膜嗜酸性粒细胞和肥大细胞的浸 润。 (3)TP可显著抑制变应性鼻炎大鼠模型鼻粘膜组织中iNOS、Eotaxin以及 NF．r．B的表达。 (4)TP可通过抑制NF．r,B的活性从而抑制iNOS、Eotaxin的表达，抑制NF-r．B 的活性可能是TP药理作用的机制之一。 (5)和DM处理组相比，TP在控制变应性鼻炎大鼠模型的症状、降低鼻粘膜 嗜酸性