杀虫剂对松墨天牛几种酶和蛋白质磷酸化的影响-农业昆虫与害虫防治专业论文.docxVIP

摘要松墨天牛是一种钻蛀性的杯业害虫，主要危害松属植物，而且其传播松材线虫造成的危害 摘要 松墨天牛是一种钻蛀性的杯业害虫，主要危害松属植物，而且其传播松材线虫造成的危害 远甚于其自身。近年来人们狂其生物学、生态学以及防治方面对其进行了人量的研究。本文从 毒理学角度研究了甲胺磷、溴氰菊酯、吡虫啉等几种代表性的杀虫剂对松墨天牛的乙酰胆碱酯 酶、羧酸酯酶、谷胱甘肽s一转移酶的体外影响，并使用同位素标记的方法研究了溴氰菊酯和甲 胺磷两种代表性杀虫剂对松墨天牛的脂肪体和头部蛋白磷酸化的影响情况。还进行了松墨天牛 体内的神经毒性酯酶活性的测试，并进行了松墨天牛细胞原代培养的探索性试验。结果如F： 甲胺磷对松墨天牛乙酰胆碱酯酶、羧酸酯酶酶、谷胱甘肽s．转移酶均有抑制作用其l，。值 分别为8．i9×101tool儿，I．95×lO’tool／L．0．908moI／L。 可以确定松墨天牛体内存在NTE活力，以头部活力较高，但甲胺磷在体外处理时不能抑制 其活力，表现出与高等动物NTE不同的性质。 溴氰菊酯和甲胺磷对松墨天牛幼虫的蛋白磷酸化的影响非常明显，放射自显影图谱上可观 察到许多发生改变的条带，而相对来说两种杀虫嗣对成虫蛋自磷酸化的影响较小。 溴氰菊酯使来自幼虫脂肪体的分子景137 8 kD蛋白质和来自幼虫头部的166．5 kD蛋白质磷 酸化水平增强，使来自幼虫脂肪体的分子量为111．4kD、95．3103和43．8kD蛋白质和来自幼虫 头部的113．2 kD、97．5 kD和50．6 kD蛋白质以及来自成虫脂肪体的51．8 kD、44 3 kD蛋白质和 来自成虫头部的43．3 kD蛋白质磷酸化水平减弱。 甲胺磷使来自成虫脂肪体的分子量为127．7kD、44．3 kD和238．9 kD蛋白质磷酸化水平增强， 使来自幼虫脂肪体的95．3 kD和43，8 kD蛋白质以及来自幼虫头部的166．5 kD和124．5 kD蛋白 质磷酸化水平减弱。 通过使用杀虫剂与cAMP和钙调蛋白(CaM)共同处理对蛋白磷酸化的影响情况进行研究， 对自显影图谱上的一些蛋白质磷酸化反应的蛋白激酶的性质进行分析，说明杀虫剂对天牛蛋向 质磷酸化影响的复杂性和多样性。由于所测试的杀虫荆对天牛体内的某些蛋白的作用情况非常 复杂，还需要进一步研究其性质才能得以确定。 本研究的结果对于松墨天牛的防治提供了毒理学参考，杀虫剂对天牛蛋白质磷酸化影响部 分的研究结果说明了杀虫剂具有广泛的生物活性，除了一般意义上使昆虫快速致死的作用靶标 之外，杀虫剂还可以作用于蛋白激酶、蛋白磷酸酶等非致死性作用靶标。本项研究结果对全面 了解杀虫剂的毒性机理以及关于杀虫剂对蛋白磷酸化影响的进一步研究具有重要的意义。 关键词： 松墨天牛杀虫剂 乙酰服碱酯酶羧酸酯酶酶谷胱甘肽s-转移酶 蛋白磷酸化原代细胞培莽 AbstractMonochamus Abstract Monochamus alternatus Hope(Co eoptera：Cerambyc dae)is not only serious pest to Pinus but also the main of pine wood nemadote Bursaphelenehus xylophilus，which pine wilt disease．There’s many researches this insect about its biology，ecology，and the methodology of its contr01．In this thesis，methamidophos，deltamethrine，and imidacloprid were chosen to be the representatives of three kinds of insecticides to test its effect acetyIcholinesterase(ACHE)， gtutathione-s-transferase(GSD，and carboxylesterases(carE)．The author studied the effect of methamidophos and deltamethrine protein phosphorylation of this insect using radioactive isotope labeling method．In addition,we assayed activity of neurotoxic esterase州TE)in this pest insect，and tried to do primary culture of the hemocytes and fat