利用柑橘茎段诱导不定芽改进微芽嫁接脱毒技术的研究-果树学专业论文.docxVIP

缩略词表勋6le 缩略词表 勋6le ofAbbreviation 英文缩略词 英文 中文 曼趔些生!塑：i!!i塑量里地!Q望!些 一一 枞 AbscisicAcid 脱落酸 m 6-Benzyladenine 6．苄基腺嘌呤 肿 Bacteria-llke Organism 类细菌病原体 吼 Casein hydrolysate 水解酪蛋白 ～ Cetyltdmethy]ammoniumBromid 十六烷基三甲基溴化胺 邛 Ehridinnl Bromide 溴化乙锭 眠 GibberellicAcid 赤霉酸 姒 3-1ndole Butytic Acid 吲哚丁酸 耵 Murashige and Tucker MT基本培养基 M d-NaphthylaceticAcid 萘乙酸 嗽 Polyraerase Chain Reaction 聚合酶链式反应 眦 Polyvinylprrolidone 聚乙烯毗咯烷酮 差|； Shoot-np Grafting 茎尖嫁接 础 Tween-80 吐温．80 他 Tris and EDlA Iris EDTA缓冲液 3 摘 摘 要 本实验进行了成年态柑橘茎段离体培养试验，并利用离体培养产生的不定芽进 行茎尖微芽嫁接，得到了成活苗；同时对带明显黄化斑驳症状和未显症状的母本树 不同柑橘品神进行微芽嫁接，均获得了成活苗，并对通过两种不同来源的茎尖嫁接 成活的植株进行聚合酶链式反应(PCR)检测。主要的结果如下： 1．通过改进的消毒方法，减少了成年态柑橘茎段离体培养的污染率。试验表明，在 炎热干燥的夏季晴天午后2点左右取半木质化茎段作为外植体培葵材料，采用闻 隔2天消毒方法，能够将茎段污染率控制在10％以内。 2．通过对茎段离体培养，获得了茎段嫩芽，并且得到了几个品种的初代培养配方； 对离体培养得到的嫩芽进行微芽嫁接．获得了成活的植株，成活率相对于田间的 嫩芽都有不同程度的提高，最高的达到80％。 3．用不同浓度的6-BA对来自田间的茎尖进行不同时间的处理，效果存在较丈的差 别，试验发现用0．Smg／L至1．0mg／L的6-BA浸泡茎尖10rain对供试品种成活率 有不同程度的提高，最高的可达60％。 4．用两种不同浓度的消毒剂不同时间的处理各个供试柑橘品种的茎尖，微芽嫁接成 活率表现出不同的效果。试验结果表明，用2％NaCIO消毒7min效果较好。 5．根据黄龙病的病原的核苷酸序列设计PCR引物。利用PCR对带明显黄化斑驳症 状的红江橙、宫川和通过茎尖微芽嫁接的成活的红江橙和宫川嫁接植株进行检 测，结果带毒症状的植株扩增到特异性扩增区带，而嫁接的植株没有特异性区带， 证明了茎尖微芽嫁接脱除了柑橘黄龙病病原，可以作为无病毒苗木繁殖的有效途 径。 关键词：柑橘黄龙病：茎段培养；茎尖微芽嫁接；检测；成活率 4 ABSTRACTnle ABSTRACT nle study was carried on tissue culture experiment of mature citrus stem．The adventitious bud through stem cultivation were used to proceed shoot-tip grafting．Through the method the experiment obtained some survival vires-free plants．The healthy and virulent different citrus breeds’apexes were used as cxplants to proceed shoot·tip grafting．Furthermore，We identified the generated planflets by specific PCR． The main results are as follows： 1．Through the modified pasteurize method the experiment released pollution rate of the mature citrus segment culture in vitro．It was propitious to improve that：The half senescent stem which were token back from the field at 2 P．m．sunny day in summer were used as explants，the interval 2 days pasteurize method Was used and can kecD the citru