课件：维生素类药物的分析 new.ppt

样品容量与柱内径、膜厚及溶解度关系，记住相似相溶原理 一般厚膜柱适合分析低沸点样品；薄液膜适合分析高沸点化合物，同时固定相流失少。 检测器：主要有热导检测器（通用）、氢火焰离子化检测器、电子捕获检测器 样品→ dl－α－生育酚 固定相→十八烷基硅烷键合硅胶 流动相→甲醇-水（49 ：1） 检测波长→292nm R＞2.6 RSD≤0.8% （二）RP - HPLC法（外标法） 对照品→ dl－α－生育酚 在220~400nm波长范围内，以发射、激发波长间隔Δλ为40nm扫描同步荧光光谱，测定同步荧光峰的荧光强度信号值。 VE= F样品 - F空白 F标准 - F空白 ?4.0（mg/L) （三）荧光分光光度法 第六节 复方制剂中多种维生素的分析 一、离子对HPLC法测定多种维生素 以樟脑磺酸作为离子对试剂，以二巯基丙烷磺酸钠作为抗氧剂 二、反相HPLC法同时测定9种水溶性维生素 三、非水反相HPLC法同时测定4种脂溶性维生素 Vit A 结构性质 鉴别反应 含量测定 共轭多烯醇侧链，立体异构 三氯化锑反应（无醇无水CHCl3） 三点校正法；换算因子；判定标准和选定结果 不溶于水，易溶于有机溶剂 紫外分光光度法 三氯化锑比色 不稳定 薄层色谱（TLC） 高效液相色谱法 紫外 三氯化锑 条件： 无水、无醇 CHCl3 三氯化锑反应 λmax为326nm 一个吸收峰 λmax为350～390nm 三个吸收峰 UV法 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 （三）其它鉴别方法 薄层色谱法 HPLC法 制备衍生物测熔点 紫外、红外吸收光谱 （四）维生素D2、D3的区别反应 维生素D2 维生素D3 96%乙醇 10ml 取0.1ml 乙醇1ml 和85%硫酸5ml 红色λmax570nm 黄色 λmax495nm 三、杂质检查 （一）麦角甾醇的检查 维生素D2 90%乙醇溶液 洋地黄皂苷溶液 不得发生浑浊或沉淀 （二）前维生素D的光照产物 λ=280-320nm 四、含量测定 正相高效液相色谱法 （一）维生素D测定法 含量以单位表示 每单位相当于维生素D 0.025μg 注意：计算的是维生素D及前维生素D经折算成维生素D的总量 测定在半暗室及避免氧化的情况下进行 第一法：无干扰杂质 第二法：有VA及其他杂质干扰 第三法：用第二法时，前 VD峰受杂质干扰 仅VD峰可分离 适用性： 内标物：邻苯二甲酸二甲酯 色谱条件及系统适用性试验： 填充剂：硅胶 流动相：正己烷-正戊醇（997：3） 检测波长：254nm 无干扰杂质 A. 第一法 维生素D3 △ 光照 前维生素D3 反式维生素D3 维生素D3 速甾醇D3 与维生素D3的比保 留 时 间 分离度 ＞1.0　 ＞1.0 溶液组成 先后进样5次，维生素D3 峰面积的 RSD≤2.0 % 0.5 0.6 1.0 1.1 校正因子测定： 维生素D的校正因子: f1=Asmi/Aims 前维生素D折算成维生素D的校正因子: f2=（Asmr-f1msAr1）/（Ar2ms） 含量测定：计算维生素D及前维生素D折算成 维生素D的总量 mi=（f1Ai1+f2Ai2）ms/As B. 第二法 第一步：皂化提取 供试品 OH- 加热回流 冷却 乙醚提取 乙醚提取液 挥干乙醚 残渣 甲醇溶解 供试溶液A 有VA及其他杂质干扰 第二步：分离收集 供试品溶液A RP-HPLC 维生素D 前维生素D 维生素A及其他杂质 叠峰 分离 收集 供试品溶液B 维生素D及前维生素D 第三步：按第一法进行含量测定（内标法） 挥干 内标的正己烷溶液 溶解 C. 第三法 第一步：皂化提取 同第二法得供试品溶液A 第二步： 供试品溶液A RP-HPLC 维生素D 前维生素D 维生素A及其他杂质 叠峰 分离 供试品溶液C 收集 维D 挥干 异辛烷溶解 90℃、1.5h 挥干 正己烷溶解 前维生素D 维生素D 第三步：用第一法色谱条件按外标法计算含量 用第二法时，前 VD峰受杂质干扰 苯 二氢吡喃 并 醇 第四节 维生素E的分析 （一）结构 THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 生育酚 乙酰化 酚羟基 维生素E 强还原性 天然品 右旋体 生物效价 右旋体:消旋体 = 1.4 : 10 合成品 消旋体 手性C * * * * 名 称 R1 R2 生物活性 α-生育酚 β-生育酚 γ-生育酚 δ-生育酚 CH3 CH3 H H CH3 H CH3 H 1.0 0.5 0.2 0.1