类细菌素产生菌的筛选改良及其发酵产物性质的初步研究-微生物学专业论文.docxVIP

2 2 诱变育种与耐药突变 43 3发酵条件优化 44 4 抑菌物质的初步定性 ---44 结论 一 45 致谢 46 声明 47 科研成果简介 参考文献 49 文献综述：类细菌素的研究进展 1 类细菌素研究的背景 54 2 天然防腐剂的发展 55 3 类细菌素产生菌一 一 一 一～ 一62 4 枯草芽孢杆菌抗茵物质的研究进展 参考文献 图形目录 图1．硫酸庆大霉素标准曲线 ～一一19 图2． 紫外线诱变LLl8-4的致死曲线一 26 图3． DES诱变L卜I-E65的致死曲线 28 图4． 不同碳源对类细菌素产量的影响 31 图5．不同浓度的葡萄糖对类细菌素产量的影响 32 图6．不同氮源对类细菌素产量的影响 32 图7．不同浓度的牛肉膏对类细菌素产量的影响 一33 图8．不同生长因子对类细菌素产量的影响 33 图9．斜面接种量对类细菌素产量的影响 35 图10 液体种子接种量对类细菌素产量的影响一 36 图11 培养基起始pH值对类细菌素产量的影响 36 Il 图12． 图12． 温度对类细菌素产量的影响 —-———————————————·——··—--·37 图13． 培养时间对类细菌素产量的影响一 ～一一37 图14． 培养基装量对类细菌素产量的影响一～ 一 一38 图15． 标准曲线中牛津杯的排列位置照片 ～一一一一20 图16． 初筛照片(平板滤纸片法) 图17． LLl8-4培养液对金黄色葡萄球菌的抑制作用照片 一22 图18． LLl8-4菌株的扫描电镜照片～一 一__- 一24 图19． 蛋白酶K处理后抑菌试验结果照片 ～ 一一一39 图20． 高产菌株的质粒电泳照片 一一一40 图21． 质粒消除菌株的质粒电泳照片 ～一41 表格目录 表1．硫酸庆大霉素标准曲线的测定结果一～一 表2．有抑菌作用的菌株数统计 一 ————————20 表3．对不同指示菌有抑制作用的菌株数统计 一一2l 表4．11株广谱抗菌菌株抑菌圈的比较 一一22 表5．不同pH下LLl8—4菌株培养液与空白样对比一 一23 表6．LLl8—4菌株的生理生化特征 ————————-23 表7．LLl8—4菌株的抗菌谱分析一 表8．LLl8-4对硫酸庆大霉素的耐药水平 ---25 表9．紫外线诱变LLl8—4的存活率 一 ～ _一- 一26 表10．硫酸庆大霉素耐药突变株效价分析一 27 1上一I—E65和LLl 8-4的效价比较一一一 27 LL-I—E65对利福平的耐药水平一 一～ 一27 DES诱变LL—I—E65的存活率 ～一28 利福平耐药突变株效价分析 一 ～一 一29 LL—I卜337和LL—I—E65的效价比较～一 29 LL—II一327产量稳定性一 一一 ～ ～一30 表表表表表表表 ¨他坞M¨M 正交试验因素、水平设计表 一 ～一一 一34 Ill 四川大学硕士学位论文38 四川大学硕士学位论文 38 表20． 细菌素和抗生素的区别 60 表21． 细菌素的分类及举例 59 表22． 紫外线诱变突变株效价分析 27 表23． 硫酸二乙脂诱变突变株效价分析 29 四川大学硕士学位论文类细菌素产生菌的筛选改良及其发酵产物 四川大学硕士学位论文 类细菌素产生菌的筛选改良及其发酵产物 性质的初步研究 微生物学专业 研究生： 李凛 指导教师： 胡承副教授 摘要 以从四川某酒厂采集的酒糟和酒糟没出液为样本，以平板培 养法富集，Ep管培养菌液，平板滤纸片法初筛，摇瓶培养菌液， 杯碟法复筛的筛选方法，得到一株对多种革兰氏阳性指示菌、革 兰氏阴性指示菌及部分霉菌具有广谱抗菌活性的类细菌素产生 菌，菌株编号LLl8—4。经形态观察及生理生化实验，鉴定该菌为 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtills)。 在类细菌素产生菌高产菌株