生命基础3基因诊断和基因治疗.ppt

生命基础3 基因诊断和基因治疗 主要内容 基因治疗 二 基因诊断 一 第一节 基因诊断 基因诊断的优势 ①可在源头上识别基因正常与否 ②针对特定基因，特异性强 ③所用的PCR等技术具有放大效应，灵敏度高 ④适用性强，诊断范围广 一、基因诊断的主要对象和样品来源 广义上，凡是用分子生物学技术对生物体的DNA序列及其产物（如mRNA和蛋白质）进行的定性、定量分析，都称为分子诊断 技术角度上，目前的分子诊断方法主要是针对DNA分子，涉及到功能分析时，还可定量检测RNA和蛋白质 临床样本：血液、组织块、羊水、绒毛、精液、毛发、唾液、尿液等 进行基因诊断的前提是疾病表型与基因型的关系已经被阐明 二、基因诊断技术 基因诊断包括 个体基因序列特征 基因突变 基因拷贝数 病原体基因是否存在 （一）基因缺失或插入的诊断 1.DNA印迹法 2.PCR法 （二）基因点突变的诊断 1. 等位基因特异性寡核苷酸分子杂交 2. 反向点杂交 3. 变性高效液相色谱 4. DNA序列分析 三、基因诊断的医学应用 （一）遗传性疾病诊断和风险预测 （二）多基因常见病的预测性诊断 （三）传染性病原体检测 （四）疗效评价和用药指导 （五）DNA指纹鉴定是法医学个体识别的核心技术 DNA指纹的遗传学基础是DNA多态性 第二节 基因治疗 以改变人遗传物质为基础的生物医学治疗 一、基因治疗的基本策略 （一）缺陷基因精确的原位修复 （二）基因增补 不删除突变的致病基因，而在基因组的某一位点额外插入正常基因，在体内表达出功能正常的蛋白质，达到治疗基本的目的。 （三）基因沉默或失活 阻断致病基因的异常表达，从而达到治疗疾病的目的。 二、基因治疗的基本程序 （一）选择治疗基因 细胞内的基因理论上均可作为基因治疗的选择目标。 （二）选择携带治疗基因的载体 非病毒载体 病毒载体 用于基因治疗的病毒载体 经改造的，剔除其复制和致病基因 1.逆转录病毒载体 2.腺病毒载体 （三）选择基因治疗的靶细胞 基因治疗的靶细胞通常是体细胞，包括病变组织细胞或正常的免疫功能细胞。 （四）将治疗基因导入人体 体内基因传递 间接体内疗法 直接体内疗法 基因导入细胞的方法 生物学方法 非生物学方法 （五）治疗基因表达的检测 PCR、RNA印记、蛋白印记、ELISA等 三、基因治疗的现状 1.单基因遗传病的基因治疗 2.多基因遗传病的基因治疗 安德森博士因此被誉为世界“基因治疗之父” 存在的问题 ①缺乏高效、靶向性的基因转移系统 ②对疾病相关基因认识有限，缺乏有效的治疗基因 ③对真核生物基因表达调控机制理解有限，治疗基因表达无法做到精确调控，无法保证安全性 ④缺乏准确的疗效评价