寄生虫病原检查技术.ppt

1、涂 片 法 2、厚涂片透明法 5、孵育幼虫法 6、粪中寄生虫 检查和鉴定 （1) 粪便直接涂片法 (2) 碘液染色涂片法 4、自然沉淀法 3、饱和盐水浮聚法 （1）钩蚴培养法 （2）毛蚴孵化法 （1）虫体的收集 （2）虫体的检查和鉴定 粪便检查 思考题: 1. 一个腹泻被怀疑为急性阿米巴的病人， 在送检粪便标本时应注意哪些问题？ 2. 一就医病人诉说在肛门逸出白色节片， 你如何进行检查鉴定是猪带绦虫还是 牛带绦虫？ 操 作 方 法 取1g粪便（约黄豆粒大小），放进 青霉素瓶内，加少许饱和盐水，先将粪便调 匀，再加饱和盐水至瓶口，挑走粪渣，去掉 气泡，然后用滴管慢慢加饱和盐水，加到略 高出瓶口，但不能溢出，最后小心放上载玻 片，静止15分钟后，将载玻片垂直提起，并 迅速翻转，置镜下检查。 饱和盐水浮聚法 注 意 问 题 ③ 提起玻片时，注意保持垂直，减少倾斜， 　 避免饱和盐水滴落。 ① 粪量不能过多，也不能太少。过多会影响 　 饱和盐水的比重，太少又会降低检出率。 ② 调粪便时，饱和盐水不能加得太多，否 则难以调匀。饱和盐水不能溢出瓶口。 优 缺 点 优点: 把虫卵集中在玻片上，比较干净， 检出率高，特别是比重轻的虫卵， 如钩虫卵检查效果最好。 缺点: 比重大的包囊和吸虫卵不能用这 　　　种方法。 操作方法：取10~30 g新鲜粪便，先用少许 水将粪便捣烂成糊状，然后加 一定量的水，把金属筛（60~80 目/吋）放在漏斗上，过滤于一个 500ml锥形量杯中，加清水冲洗 四、自然沉淀法 （水洗沉淀法）(p74) 用 途：用于检查原虫包囊和蠕虫卵。 残渣，拿走金属筛及漏斗，加水至近杯口 沉淀20~30分钟后，轻轻倒去上清液，保留 沉渣，再加清水至近杯口处静置。如此反 复清洗、沉淀三次，最后倒去上清液，沉 淀20～30分钟后，吸取沉淀物镜检。 自然沉淀法 原理: 比重原理 优点：取粪量多，且虫卵和包囊集中， 检出率较高。 缺点: 繁琐，费水费时，对比重接近水的 虫卵（如钩虫卵，微小膜壳绦虫卵） 或包囊（如溶组织内阿米巴包囊、 蓝氏贾第鞭毛虫包囊）， 检出效果差。 ① 倒去上清液时，要一次倒完， 不要中途停顿，以免将沉渣翻起。 ② 吸取沉渣时，要注意先压去吸管中 的空气，然后慢慢将吸管插进量杯 底部，吸取沉渣镜检。 注 意 问 题 思考题: 直接涂片法可检查哪些寄生虫卵? 每一种寄生虫卵的主要诊断依据是什么? 五、孵育幼虫法（p74） （有2种方法） 下面介绍的是试管滤纸培养法。 用 途：用于检查钩虫幼虫。 1、钩蚴培养法 常用两种方法。 （1）玻皿培养法或炭未培养法。 特 点: 使幼虫掉在水底，以利于检查。 原 理：利用虫卵在适宜条件下可以在短时 间内孵出幼虫的特点 （2）试管滤纸培养法 (p74) 操 作 方 法： 取干净试管一支，加入冷开水1ml。剪 一长度比试管略短，宽度比试管稍宽的滤纸条。 上端用铅笔写上受检者姓名和编号。取粪便 0.2～0.4g（约黄豆大小）均匀涂抹在滤纸上2/3 处，再把纸条插进试管，下端浸泡在水中，但粪 便不能接触水面。置20～30℃条件下培养，3天后 用肉眼或放大镜观察管底。如未发现钩蚴，应培 养观察到第5天。观察有无作蛇形运动的钩蚴。 钩蚴培养法 注意问题： 1、滤纸条上的粪便不能接触水。 2、在培养期间注意补充冷开水， 以保持水面位置。 2、毛蚴孵化法(p144) 用 途：用于日本血吸虫的诊断。 原 理：虫卵内的毛蚴在适宜条件下，由 于低渗透压，毛蚴分泌排泄物中 的酶活力和毛蚴活动等作用，使 卵壳破裂而孵出毛蚴。 操 作 方 法： 取一个三角烧瓶，放进经自然沉淀法所 取得的沉渣，或经剁烂的含虫卵的肝组织， 沿瓶壁轻轻加水至离瓶口约1㎝处，20～30℃ （最适宜25℃）温箱中孵化，4～6h后用肉眼 或放大镜观察结果。在24h内观察2～3次。毛 蚴针尖大小，银白色，在清水表层作直线运 动。为了易于观察，可用黑纸作衬。 毛蚴孵化法 注意问题： ① 粪便或