叶酸生物合成途径中调控基因folB表达载体的构建及在大豆中的转化.pdf

分子植物育种，2015 年， 第11 期，第2416-2420页 第13 卷， Molecular Plant Breeding, 2015, Vol.13, No.11, 2416-2420 研究论文 Research Article 叶酸生物合成途径中调控基因 表达载体的构建及在大豆中的转化 folB 1 1 1 1 2 1* 张原宇 张玲 王玉民 邢国杰 邢彬 李海云 1 吉林省农业科学院农业生物技术研究所, 长春, 130033; 2 辽河农垦管理区, 四平, 136507 * 通讯作者, hyli512@126.com 摘 要 叶酸是一种水溶性B 族维生素，是维持人体正常活动所必需的营养元素之一，也是植物体内参与 一碳单元反应的重要辅酶。 基因是叶酸调控基因，来源于拟南芥，调控叶酸合成途径中的关键酶DHNA folB 的生成。本研究将人工合成的folB 基因转入大豆受体材料Williams82 中。共侵染200 个大豆外植体，得到26 株转化苗。通过对转化苗的草丁膦(浓度150 mg/L)涂抹鉴定，获得16 株除草剂抗性转化苗。通过PCR 检测， 得到12 株PCR 阳性转化苗。经过 试纸条检测，其中10 株为阳性。Southern 杂交结果表明，9 株转化苗为 bar Southern 杂交阳性。研究结果表明：外源功能基因 和筛选标记基因 已经整合到大豆基因组中。相应 folB bar 的转基因后代表现出除草剂抗性和folB 基因Southern 杂交阳性。本研究通过将folB 基因转入大豆，获得了 转基因后代，以此为基础可进一步选育高叶酸含量的转基因大豆品种。 关键词 转基因大豆, 叶酸,folB , 农杆菌介导 Construction of the Folate Biosynthetic Pathway Regulatory Gene folB and Transformation of Soybean Zhang Yuanyu 1 Zhang Ling 1 Wang Yumin 1 Xing Guojie 1 Xing Bin 2 Li Haiyun 1* 1 Agro-Biotechnology Research Institute, Jilin Academy of Agricultural Sciences, Changchun, 130033; 2 Liaohe Agricultural reclamation Authority, Siping, 136507 * Corresponding author, hyli512@126.com DOI: 10.13271/j.mpb.013.002416 Abstract Folate is one of the necessary nutrient elements which is water-soluble B-vitamins supported human body normal activities. Also is an important coenzyme involved in one carbon unit reaction in the plant. The folB is a key gene of folate pathway, which regulated production of a key enzyme for DHNA and derived from Arabidopsis thaliana. In this study, we expressed the folB by employing the soybean cotyledonary nodes method. We co-cul- tivated about 200 explants, and got 26 transge