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6/5科學實作練習活動 生物科技與生命倫理 ~DNA的真相~ DNA萃取原理 將複雜的細胞分子混合物加入有機溶媒，除去蛋白質及其他成分，就可以純化DNA。 一般常用酚及氯仿(phenol/chloroform)可使蛋白質變性(denaturaion)的特性來進行萃取的步驟，DNA和RNA不溶於有機溶媒中，而溶於水層。 另外，分子選殖(molecular cloning)常利用洋菜膠(agarose)來分離不同大小的DNA片段或用以純化DNA。 放置恆溫水槽65℃ for 6 minutes 放置恆溫水槽98℃ for 2 minutes 口腔黏膜細胞 DNA萃取溶液 ＊口腔細胞DNA萃取步驟 ＊組裝水平電泳膠片等膠片凝 固約15分鐘 DNA水平電泳槽 Agarose(膠片) (三分一的高度) 1.拿Loding dye +自己口腔萃取DNA溶液 染色1:5 2.電壓100V：電流由負極往正極流 3.加好SAMPLE 等待25分鐘左右 Etbr染色原理 EtBr會嵌入核酸配對(雙股DNA或單股DNA、RNA的自我配對二級結構)之間。 EtBr受到紫外線照射時會發出橘紅色的螢光，與核酸結合時的螢光強度約是游離態時的20倍。藉此可偵測核酸。 (1)溴化乙啶(ETBR)染色 (2)在使用UV照射 (3)最後使用電泳膠片顯像儀， 看自己DNA序列 (跑好電泳膠片) 1.注意事項: (1)ETBR是一個致癌化學物質 ，使用前請戴手 套，使用請小心，觸碰到ETBR請別亂摸周遭環境 2.ETBR廢棄物要在陽光下，照射N禮拜才會分解掉 * * * * * * * * * * * * * * * *
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