大鼠不同发育阶段β-防御素-2基因在肺组织的表达研究3.pdf

( ) ·226 · 中国病理生理杂志 　Chinese Journal of Pathophysiology 　2001 ,17 3 : 226 - 229 ( ) [文章编号] 　1000 - 4718 2001 03 - 0226 - 04 β 大鼠不同发育阶段 - 防御素 - 2 基因 在肺组织的表达研究 周 　慧 , 　黄 　宁 , 　 陈新年 , 　吴 　琦 , 　王伯瑶 (华西医科大学感染免疫研究室和病理生理教研室 , 四川 成都 610041) 　　[摘 　要] 　目的: 探讨大鼠β 方法 : 根据 Genbank 大鼠β - 防御素 - 2 基因在肺组织表达的发育调控 。 - 防御素 - 2 的 cDNA 序列 ,设计一对特异引物 。采用 RT - PCR 技术在大鼠不同发育阶段的肺组织总 RNA 中 ,扩增其特异 cDNA 片段 ,并进行 DNA 序列测定 。借助 Genbank 中BLAST 程序 ,将从该 cDNA 序列推导的氨基酸序列与人的 hBD - 2 和大鼠的rBD - 1 做相似性分析 。结果 : 从足月胎鼠、出生 8 h 和 4 d 以及成年大鼠相同重量肺组织所提取的总 RNA 中 ,均扩增出一条密度相同、长度约为 220 bp 的cDNA 片段 。在所推导氨基酸序列中与 hBD - 2 氨基酸相同率为 486 % ( 17/ 35) , 与 rBD - 1 氨基酸残基的相同率为 31 % ( 11/ 35) 。其成熟分子链长 35 个氨基酸残基 ,含β - 防御素 共有的且排列次序相同的6 个典型的半胱氨酸和其它保守氨基酸残基 。结论 : 本实验表明不同发育阶段大鼠肺组 β 织均表达 - 防御素 - 2 mRNA ,提示该分子可能是肺组织天然抵抗微生物感染的一个重要分子基础 。 [主题词] 　免疫学 ; 大鼠; 肺 ; 基因表达 [ 中图分类号] 　R3922 ; R39232 　　　　　 [文献标识码] 　A ( ) 　　内源性抗生素肽 endogenous antibiotic peptides Katara 公司产品 , RNA 提取试剂盒为 Qiagen 公司产 是天然免疫的重要介质 ,是炎症反应起保护作用的 品。余为国产分析纯 。 重要分子基础[ 1] 。防御素是在哺乳动物发现的主要 2 　质粒和菌株 ( ) p GEM - T easy 载体系统购 自Promega 公司 ,宿主 抗生素肽家族 ,其分子量较小 35 - 45 kD , 分子 内含 6 个保守的半胱氨酸残基 ,形成 3 个链 内二硫 菌JM109 株 。 键 。依据一级结构和二硫键形成次序不同 , 防御素 3 　大鼠肺组织总 RNA 提取 α β [2 ] 不同发育阶段 Wistar 大鼠由本校动物实验中心 可分为 和 两个亚家族 。