传染病实验:实验室诊断.docVIP

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传染病实验报告 一、实验材料:病鸭、镊子、剪刀、托盘、普通平板、麦康凯平板、血平皿、接种环、酒精灯、药敏纸片、生化管、注射器、小白鼠 二、实验方法:病理解剖观察、病料接种培养、特殊平板培养、生化实验、药敏试验、动物实验、玻板凝集实验(演示) 三、实验内容及步骤: 病理解剖观察: 观察鸭子的天然孔道,是否有异常黏液分泌 2、打开病鸭腹腔,采用“三刀法”打开腹腔(两只鸭腿与腹部交接的地方各剪一刀,腹部中间再剪一刀)。同时注意观察皮下及胸、腿部肌肉有无异常(如出血、皮下水肿等)。 3、检查皮下及肌肉:观察皮下与肌肉是否有出血坏死,皮下是否有渗出物等。 4、检查体腔与内脏:注意体腔内、气囊是否有异物,是否增厚、有绿斑、出血等现象,内脏器官的体积、颜色、性质是否异常。 (1)呼吸系统:主要检查鼻腔内是否有异常分泌物;气管是否有出血环,有异常黏液分泌;肺脏颜色形状是否正常,是否有出血坏死肿大等现象。 (2)消化系统:口腔是否有黏液;食道是否有出血,坏死灶溃疡;肌胃腺胃是否出血有坏死灶,乳头是否肿胀;肠道是否有充血出血坏死灶;肝脏是否发坏生变性,肿大,有无出血点,出血斑,坏死等异常;胰脏是否有出血,坏死。 (3)泌尿系统:主要检查肾脏,是否肿大,有出血坏死尿酸盐沉积。 (4)心血管系统:心脏的颜色,是否有心包积液;各处血管是否有充血现象。 (5)淋巴系统:检查胸腺、法氏囊是否肿大出血;肠道淋巴结及盲肠扁桃体是否异常。 (6)神经系统:检查颅腔脑是否肿大,积液,脑膜有无异常;神经粗细颜色。 病料接种培养 1、选取病变明显典型的部位接种,大鸭子选取脑、肝、脾、肺接种,小鸭子选取接种,并将血平皿划分成相应的几部分做好标记。 2、将接种环酒精灯灭菌,蘸取相应部位,使用“Z”形划线接种法划线接种。每蘸取一个部位后都要进行酒精灯燃烧灭菌,接种时应在酒精灯周围进行。 3、将接种好的血平皿放置在37℃恒温下培养24小时后取出观察菌落生长情况。 (三)特殊平板培养 1、选取病变明显典型的部位接种,大鸭子选取脑、肝、脾、肺接种,小鸭子选取接种,并将麦康凯平板划分成相应的几部分做好标记。 2、将接种环酒精灯灭菌,蘸取相应部位,使用“Z”形划线接种法划线接种。 3、将接种好的麦康凯平板放置在37℃恒温下培养24小时后取出观察其生长情况。 (四)生化实验 1、选取(二).3中培养好的细菌,大鸭子选取 接种的细菌,小鸭子选取两种不同菌落形态的细菌。 2、将接种环灭菌蘸取相应细菌至生化管,37℃恒温,24小时后拿出观察。 (五)药敏试验 1取适量培养的细菌与一定生理盐水混合均匀,用棉签蘸取后涂布于普通平板上; 2待平板上的菌液晾干后,将带有卡那霉素、氨苄西林、氟苯尼考、头孢曲松、多西霉素、恩诺沙星、磺胺甲基异恶唑的药敏纸片贴于平板上; 3将贴好药敏纸片的平板放于37℃恒温箱中培养24小时后观察结果。 (六)动物试验 1、在EP管中加入适量的生理盐水,选取(二).3中培养好的细菌,大鸭子选取 接种的细菌,小鸭子选取两种不同菌落形态的细菌,用灭菌后的接种环分别蘸取至EP管中,混匀制成菌液。 2、分别用一次性注射器将三种菌液分别注入三只小鼠体内(皮下注射,注射时要缓慢推进以防局部积液),并将小鼠做好标记。24小时后观察小鼠病理特征。 (七)玻板凝集实验(演示实验) 1、分别编号1号,2号,3号。再分别往1号,2号,3号玻片中加入40ul抗原,40ul抗原,40ul生理盐水。其中3号作为对照。 2、分别往1号,2号加入10ul血清,5ul血清,3号不加血清。一段时间后观察现象。 四、实验结果 病理解剖观察 1、大鸭子: 呼吸系统:气管出血;肺脏有出血点。 消化系统: 食道充血;胃浆膜面出血;,肠道表面充血出血,肠系膜出血;肝脏肿胀,质脆易碎,表面斑驳有针尖大小的坏死灶;胰脏有透明样坏死灶;气囊广泛出血。 泌尿系统: 肾脏质脆易碎,花斑肾。 心血管系统:心包黄色积液,有出血点,心冠脂肪出血。 淋巴系统:胸腺肿大;法氏囊有出血斑;脾脏肿大,呈大理石样变。 神经系统:脑充血,神经无明显症状。 2、小鸭子: 呼吸系统:气管出血;肺脏出血;气囊均有出血斑。 消化系统: 食道充血;腺胃肌胃出血;肝脏肿大,有针尖大小坏死灶,颜色布局不均匀,质脆;肠道黏膜充血出血,肠系膜出血;泄殖腔出血,胰腺有针尖大小坏死灶,透明样坏死。 泌尿系统: 肾脏质脆,花斑肾。 心血管系统:心脏心包积液,心冠脂肪出血,心脏有出血点,充血严重。 淋巴系统:胸腺肿大;脾脏肿大有坏死灶,成大理石样;法氏囊有出血点。 神经系统:神经无明显症状。 病料接种培养(血平皿培养) 1、大鸭子平板:菌落均呈乳白色,光滑,圆形菌落,无溶

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