培养基灭菌与空气净化培训教材.ppt

防腐（antisepsis） 利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的措施。 （1）低温 （4）高渗 （2）缺氧 （5）高酸度 （3）干燥 （6）防腐剂 谷氨酸棒状杆菌的培养液常采用的灭菌方法是（ ） A．高压蒸汽灭菌 B．高温灭菌 C．加入抗生素灭菌 D．酒精灭菌 空气过滤除菌介质 （１）纤维状或颗粒状过滤介质 棉花：有弹性，纤维长度适中（常用） 玻璃纤维：直径小，不易折断，过滤效果好。 活性炭：要求质地坚硬，颗粒均匀。 缺点：体积大，装填费时费力，松紧度不易掌握，空气压降大。 发酵生产中制备无菌空气的大致过程 空气过滤除菌流程 发酵生产中制备无菌空气的大致过程 空气净化的流程 吸气口吸入的空气先经过压缩前的过滤 进入空气压缩机（120?150°C） 冷却（20?25°C），除去油、水，再加热至30 ?35°C。 最后通过总过滤器和分过滤器，获得洁净度、压力、温度和流量都符合要求的无菌空气。 发酵设备——发酵罐 发酵罐的特点 轴封严密，泄漏少 能承受一定压力、温度 搅拌通风装置保证气液充分混合 具有足够的冷却面积 死角少，灭菌彻底 适宜的径高比（高与直径的比值为2.5—4） 发酵罐的类型 搅拌釜反应器 鼓泡式反应器 气升式反应器 发 酵 控 制 Fermentation control 实验一 产酶菌株的筛选 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生长培养特性。 采样：有针对性地采集样品。 增殖：人为地通过控制养分或培条件，使所需菌种增殖培养后，在数量上占优势。 分离：利用分离技术得到纯种。 发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工艺等。 （一）采样 1、采样对象 以采集土壤为主。一般园田土和耕作过的沼泽土中，以细菌和放线菌为主，富含碳水化合物的土壤和沼泽地中，酵母和霉菌较多，如一些野果生长区和果园内。采样的对象也可以是植物，腐败物品，某些水域等。 2、采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。 3、采土方式：在选好适当地点后，用小萨子除去表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时间、地点、环境条件等，以备查考。为了使土样中微生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步分批寄回，以便及时分离。 （二）增殖培养 为了容易分离到所需的菌种，让无关的微生物至少是在数量上不要增加，可以通过配制选择性培养基，选择一定的培养条件来控制。 例如碳源利用的控制，可选定糖，淀粉、纤维素，或者石油等，以其中的一种为唯一碳源，那么只有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长，而其它微生物就可能死亡或淘汰。这样对下阶段的纯种分离就会顺利得多。 （三）培养分离 尽管通过增殖培养效果显著，但还是处于微生物的混杂生长状态。因此还必须分离，纯化。在这—步，增殖培养的选择性控制条件还应进一步应用，而且控制得细一点，好一点。纯种分离的方法有划线分离法、稀释分离法。 （四）筛 选 这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件，通过三角瓶的容量进行小型发酵试验，以求得适合于工业生产用菌种。 （五）毒性试验 自然界的一些微生物是在一定条件下产毒的，将其作为生产菌种应当十分当心，尤其与食品工业有关的菌种，更应慎重。据有的国家规定，微生物中除啤酒酵母、脆壁酵母、黑曲霉、米曲霉和枯草杆菌作为食用无须作毒性试验外，其他微生物作为食用，均需通过两年以上的毒性试验。 1，糖类灭菌的温度最好控制在115度，30分钟，超过这个温度容易碳化，另外如果重复灭菌的话也容易碳化。 2，所以培养基最好先用现配，有同学问灭过菌的培养基不能灭第二次。某些物质在重复高压加热后会产生对菌体细胞生长不利的物质。另外，如果是选择性培养基再重复灭菌后会降低选择性。 3， 在连消前，发酵罐要事先空罐灭菌，加热器、维持罐、冷却器也要先进行灭菌。培养基经配料后，经配料罐放出，用连消泵送入加热塔，料液被加热至灭菌温度，由顶部流出，进入维持罐，维持10min,由维持罐上部侧位流出，经喷淋冷却到发酵温度，送去发酵罐。 缺氧：真空包装。 因为微生物的培养有间歇培养及连续 高空取气 为远离地面几十米的管子。 每升高10米，空气中杂菌降低一个数量级。因此从高空取气要比从低空取气有利得多。 粗过滤器 作用：捕集较大的灰尘