动物细胞融合与单克隆抗体解读.pptx

动物组织块 细胞悬液 原代培养 传代培养 胰蛋白酶处理分散成单个细胞 幼龄动物的器官组织；动物胚胎 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 加入培养液 用胰蛋白酶等处理贴壁细胞 适宜条件 不死性细胞 课 前 复 习 代孕母牛 胚胎 移植 体细胞核移植过程（体细胞克隆动物） 存在的问题（1）成功率非常低 （2）克隆动物表现出遗传和生理缺陷等健康问题（3）对克隆动物食品的安全性问题也存在争议。 专题2 细胞工程 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 主备人：姚雪丰 议课时间：第15周 上课时间：第17周 环节Ⅰ：学习目标 1.掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。 2.简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。 3.了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说出其应用实例。 阅读教材52∽54页，回答下列问题： 环节Ⅱ：问题导学 1.植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术有什么不同？ 2.常规血清抗体与单克隆抗体有何区别？ 3.单克隆抗体怎么制备？ 4.单克隆抗体主要有哪几方面的用途？ 一、动物细胞融合 9:45 环节Ⅲ：点拨精讲 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果 形成单核的杂交细胞 3、原理 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒 一、动物细胞融合 动物细胞融合过程示意图 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 有丝分裂 两个完整的杂交细胞 技巧归纳 灭活的病毒能作为诱导剂,不灭活的病毒不能作为诱导剂 1.灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。 2.不灭活的病毒会感染细胞,而不能诱导细胞融合。 5、过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 1个完整的杂交细胞AB （膜融合、质融合） （核融合） 细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核 6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用： 成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 最有价值的应用 制备单克隆抗体 动物细胞融合 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 植物体细胞杂交 去壁 原生质体融合 植物组织培养 物理法 化学法 生物法： 灭活的病毒 常用方法 8.植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 8.植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较 　　例1　下图表示细胞融合技术的一些过程,请据图回答: (1)若A、B细胞为动物细胞,从A 和B细胞到C细胞的过程中,常用 　　　　　　　　作为　　　　来 诱导融合。A、B融合为C的过程 说明细胞膜具有　　　　特性。其融合完成的标志是 　　　　　　　　。得到的C细胞可称为　　　　　　　　。  灭活的病毒　 诱导剂　 流动性　 细胞核融合　 杂交细胞　 (2)若A、B细胞为植物细胞,那么这样的细胞已经用酶降解去掉了 　　　 　,这种酶可能是　　　　　　　　酶,由此生成的A和B细胞称为　　　　 。A、B到C细胞的过程中,常用的物理方法是 　　　　　　　　　;融合完成的标志是　　　　　　　　　　;形成的D细胞还要应用　　　　　　　　　　技术把D培养成植株。  (3)若A为人细胞,B为鼠细胞,并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质,在形成C细胞时,细胞一半发红色荧光,一半发绿色荧光。到D细胞阶段,两种颜色的荧光均匀分布,原因是 　 。  细胞壁　 纤维素酶和果胶　 原生质体　 离心、振动、电激　 形成新的细胞壁　 植物组织培养　 细胞膜上的蛋白质是可以运动的 二、单克隆抗体 什么是抗体？ 由何种细胞产生？ 主要分布在哪里？ 起何作用？ 效应B细胞 血清 特异性免疫作用 抗体：机体受抗原刺激后产生的，并且能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 读下面一段文字资料，思考以下问题： 长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞