生物复合材料生物相容性及成骨效应的实验研究.docVIP

生物复合材料生物相容性及成骨效应的实验研究 宋扬* 杨彦君* 程维* * 北华大学附属医院骨外二科 吉林省吉林市 摘要 目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（）复合珊瑚羟基磷灰石（）及自体红骨髓（）修复骨节段性骨缺损中的作用，为进一步临床应用提供理论依据。方法：实验于在北华大学生命科学研究中心完成。取只家兔制作双侧桡骨干完全缺损模型，随机分成组，每组只：（）组、（）组、（自体骨）组，（旷置）组，于、、、周进行大体观察，影像学及组织学评估评价各组修复骨缺损的效果。 结果：只兔子进入结果分析，组及组各死亡只。组影像学及组织学观察优于单纯组，组与自体骨组周时组织学评价无统计学差异。结论：生物复合材料具有较强的成骨能力，可代替自体骨，成为新型的人工骨。 关键词：碱性成纤维细胞生长因子; 珊瑚羟基磷灰石;自体红骨髓;骨缺损;人工骨;兔子线检测;病理组织学观察。 * * * : () () () , . : , . () , () , ( ) , ( ) . , , , . : . . : , , . : ; ; ; ; ; . 骨缺损一直是骨科常见并发症，而骨移植是目前临床修复骨缺损常采用的方法，骨移植物有多种，如自体骨，异体骨及人工骨等，但自体骨来源有限，取髂骨带来一定的并发症等，异体骨免疫排斥及价格昂贵等问题，不能满足临床用量。我们研制出一种人工骨复合材料，进行动物研究，为临床应用提供理论依据。 、材料与方法 时间及地点：实验于年月到年月在北华大学生命科学研究中心实验室及北华大学第一临床医院完成。 材料： 实验动物 健康成年家兔只（北华大学动物实验中心提供），雌雄不限,体质量 ，动物饲养于光线良好，同样室温和同样湿度下的饲养室内喂养。 、试验方法 复合材料的制备：生物复合材料的制备：聚乙烯吡咯烷酮、蒸馏水混匀混合成有粘性的溶液，作为的缓释载体备用。取生理盐水溶液（含），取 克，形状为×珊瑚羟基磷灰石人工骨条。用直径可空心针在兔的髂嵴部位抽取红骨髓。°室温下，将聚乙烯吡咯烷酮溶液、溶液、及自体红骨髓充分混合备用。 造模与分组：依据《中华外科杂志》所载柴本甫《骨折模型》的方法行标准动物造模[]。取戊巴比妥钠溶液在兔的耳缘静脉进行麻醉。兔的前腿桡侧硫化钠脱毛，保尔康溶液充分消毒，取桡侧长约切口，切开骨膜，骨膜下剥离，显露桡骨，骨剪去除桡骨中段宽3mm深2mm的骨缺损，深度达髓腔，制造成骨缺损。术后天每日早晚给予青霉素万单位肌注抗感染。 分组 用随机数字法平均分为组，每组只，（）组、（）组、（自体骨）组，（旷置）组。珊瑚羟基磷灰石()由北京北京市意华健科贸有限责任公司提供，碱性成纤维细胞生长因子（）由长春生物制品所提供。 、观察项目及方法: 大体观察；观察切口愈合情况，是否红、肿、窦道及流脓等； 线片 各组实验兔分别于术后第、、、周时在，，，条件下对兔的左前腿进行线投照，成像后，读片采用盲法,评价两项参数。根据骨折愈合过程中外骨痂和骨折线的变化规律,将外骨痂和骨折线进行如下半定量。()外骨痂可定量为分:外骨膜无反应分:外骨膜出现了反应; 分:外骨痂大小或密度较前明显提高分:外骨痂连在一起形成皮质骨桥分:外骨痂轻度吸收分:外骨痂明显吸收分:外骨痂接近完全吸收,骨折处皮质骨密度接近正常皮质骨。()骨折线可定量为分:骨折线清晰无变化分:骨折线开始变为模糊分:骨折线模糊未消失,但出现较牢固的连接迹象分:骨折线己消失,骨折线被高密度的骨痂取代分: 骨髓腔处密度开始减低分:骨髓腔处密度减低明显分:骨髓腔完全再通。将上述两参数评分相加即为骨折愈合的线评分[]。 读片由同一位高年资放射科医师完成，对骨痂及骨折线情况进行半定量分析和评价。 染色检测 分别在、、、周时取下动物的桡骨骨缺损部位，去除骨附着的软组织，将其置于多聚甲醛溶液℃下固定，后再将其置于质量分数为的 溶液脱钙[](每两到三天更换次脱钙液)。待骨质松软，针刺刀割无明显阻力后表示脱钙完成。以骨段纵轴为中心剖开骨段，经系列乙醇脱水、透明、浸蜡、剖面向下，低熔点石蜡包埋。用全自动切片机切成厚度约μ的蜡片，将蜡片分别展于载玻片上，做好标记，置于干燥箱中，℃烤片 。石蜡切片经次二甲苯脱蜡，梯度乙醇下行至水略洗， 苏木精溶液染色 后水洗，