复方补骨脂颗粒长期毒性研究.docVIP

PAGE PAGE 1 复方补骨脂颗粒长期毒性研究 　　[摘要]　目的　研究复方补骨脂颗粒经口服给药途径的长期毒性。　方法　以临床成人日用量的60、30、15倍连续灌服3个月，停药2周，分别称量大鼠体重，计算脏器系数，测定血液学和血液生化学指标，并做病理组织学检查。　结果　复方补骨脂颗粒三组剂量大鼠均未出现中毒症状，大鼠体质量、摄食、血液学、血液生化学和病理组织学等均未见毒理学意义的异常改变。　结论　复方补骨脂颗粒口服长期服用对大鼠无明显毒性反应，其无毒反应剂量为16　g/（kg?d），可推荐临床使用。 　　[关键词]　复方补骨脂颗粒；大鼠；长期毒性 　　[中图分类号]　R284.1[文献标识码]　A[文章编号]　1673-7210（2012）12（c）-0025-03 　　复方补骨脂颗粒为治疗骨质疏松的临床经验方，由补骨脂、知母、核桃仁、黄柏、延胡索、怀牛膝、砂仁、薏苡仁组成并对其合成工艺、质量标准、药效学等方面进行了较为系统的研究[1-3]。经临床验证，其具有良好的治疗骨质疏松的作用。复方补骨脂颗粒的主要给药方式是口服，为进一步了解复方补骨脂颗粒临床长期用药的安全性，参照《中药、天然药物长期毒性研究技术指导原则》的相关规定[4]，进行长期毒性试验。长期毒性试验可以观察连续反复给药时，实验动物出现的毒性作用、剂量与毒性效应的关系、主要毒性靶器官、毒性反应的性质和程度、毒性反应是否可逆等，是临床前毒性评价的主要内容，是新药审评重点内容之一，它为临床安全用药的剂量设计提供参考依据，为临床毒副作用的监护及生理生化指标检测提供依据[5]。本实验以大鼠为对象，观察大鼠首先出现的症状和严重程度、毒性反应的靶器官及其恢复和发展情况，确定无毒剂量，为拟定人用安全剂量提供实验依据。 　　1　材料与方法 　　1.1　药物 　　复方补骨脂颗粒，由本实验组将补骨脂等八种中草药经煎制浓缩调制而成，批号：060215。 　　1.2　动物 　　SD大鼠（二级），雌雄各半，体重90～100　g，由河北省实验动物中心提供，许可证号为SCXK（冀）2003-1-003。 　　1.3　试剂 　　丙氨酸氨基转换酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转换酶（AST）、尿素氮（BUN）、肌酐（CREA）、碱性磷酸酶（ALP）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、总胆固醇（CHO）、总胆红素（BIL）、血糖（GLU）检测试剂分别由南京建成生物工程研究所，首都医科大学首医临床医学科技中心、保定长城临床试剂公司提供。 　　1.4　试验方法[6] 　　将大鼠随机分成4组，每组20只，雌雄各半，每笼饲养5只，分别为正常对照组，复方补骨脂颗粒小剂量组（4　g/kg，相当于临床用药的15倍），复方补骨脂颗粒中剂量组（8　g/kg，相当于临床用药的30倍，）复方补骨脂颗粒大剂量组（16　g/kg，相当于临床用药的60倍）。大剂量组大鼠于每日上午8点、下午4点灌胃给予浓度0.8　g/mL的受试物，中剂量组大鼠于每日上午8点、灌胃给予浓度0.8　g/mL的受试物，下午4点灌胃给予等容量蒸馏水，小剂量组大鼠于每日上午8点灌胃给予浓度0.4　g/mL的受试物，下午4点灌胃给予等容量蒸馏水；对照组大鼠于每日上午8点灌胃给予等容量蒸馏水，容量均为1　mL/100g体重，每周定时给药7　d，并称重1次，根据体重变化调整给药量，连续3个月。末次给药后，动物禁食12　h（不禁水），各组活杀10只大鼠，剩余10只大鼠作恢复期观察。试验周期为3个月；恢复期为2周。 　　1.5　检测指标 　　从购入日到恢复期结束，每天2次观察动物的外观体征、行为活动、二便情况；给药期间以及恢复期每周称1次体质量，测1次进水进食量；给药结束和恢复期结束各检测1次血液学及血液生化学，各组分别取一半动物的主要脏器进行肉眼观察、病理检查并计算脏器系数[7-8]。 　　1.6　统计学方法 　　采用SPSS　14.0进行统计学分析，计量资料数据以均数±标准差（x±s）表示，采用方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示，采用χ2检验。以P　　0.05为差异有统计学意义。 　　2　结果 　　2.1　一般状况 　　各组大鼠在整个试验期内，各组动物的外观、毛色、行为、体征、四肢活动及粪便尿液性状均属正常，并无一死亡。 　　2.2　对大鼠体重的影响 　　结果显示，各组大鼠体重增长差异无统计学意义（P　　0.05）；复方补骨脂颗粒（4、8、16　g/kg）连续12周灌胃给药对大鼠体重均无明显影响（P　　0.05）。见表1、2。 　　2.3　对大鼠血液学指标的影响 　　结果显示，各组大鼠外周血红细胞数、血红蛋白、血小板数、白细胞数及分类、凝血时间差异均无统计学意义（P　　0.05），说明三个剂量组对大鼠的各项血液学指标均无明显影响。见表3