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实验八、叶绿体色素的提取和分离(p97) 实验八:叶绿体中色素的提取和分离 1.实验原理: (1)色素提取:叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇(丙酮)中,用无水乙醇提取色素。 (2)色素分离:叶绿体中色素在层析液(汽油)中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢,这样,叶绿体中的色素就在扩散过程中分离开来。 2.实验方法步骤: (1)提取绿色叶片中的色素:称取5g新鲜绿色叶片,剪碎放入研钵中,向其中加入少许碳酸钙和二氧化硅,再加10mL无水乙醇,进行迅速充分研磨,将研磨液倒入漏斗中过滤出色素液。 (2)制备滤纸条 (3)色素分离——纸层析法 (4)观察实验结果 (5)整理、洗手 3.注意事项: 问题讨论 1.色素提取原理?色素分离方法是什么? 2.某同学在做叶绿体中色素提取实验时,收集到的色素提取液是淡绿色的,分析原因可能是( ) ①研磨不充分,色素未能充分提取出来 ②丙酮加入太多,稀释了色素提取液 ③丙酮加的太少,色素未提取出来 ④未加CaCO3 粉末叶绿素分子已经被破坏 A.①②④ B.①③④ C.③④ D .①② 淡绿色—单位体积内叶绿素含量少。材料不绿、研磨不充分、提取液太多,色素被稀释.色素被破坏 A 在叶绿体色素的分离实验中,要使色素带清晰又整齐,应采取的措施是 ①定性滤纸要干燥 ②剪去滤纸条一端两角 ③滤液细线画细而直 ④重复画线 ⑤盖上培养皿盖 实验九、探究酵母菌的呼吸方式(p91) 一、实验原理 1.酵母菌是单细胞真菌属于兼性厌氧菌。进行有氧呼吸产生 水和CO2 ,无氧呼吸产生酒精和CO2 。 2. CO2的检测方法 (1)CO2使澄清石灰水变浑浊 (2) CO2使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄 3.酒精的检测 橙色的重铬酸钾溶液在酸性下与酒精发生反应,变成灰绿色。 二、实验假设 酵母菌在有氧情况下进行有氧呼吸,产生CO2,在无氧情况下 进行无氧呼吸,产生CO2和酒精。 三、实验用具(略) 四、实验结果预测 1.酵母菌在有氧和无氧情况下均产生了CO2,能使澄清石灰 水变浑浊。 2.酵母菌在有氧情况下,没有酒精生成,不能使重铬酸钾溶 液发生显色反应;在无氧情况下,生成了酒精,使重铬酸钾溶 液发生灰绿色显色反应。 3.酵母菌的有氧呼吸比无氧呼吸释放的CO2要多 五、实验步骤 1.配制酵母菌培养液(等量原则)置于A、B锥形瓶 2.组装有氧呼吸和无氧呼吸装置图,放置在25-35 ℃、环境 下培养8-9小时。 3.检测CO2的产生 4.检测酒精的产生 (1)取2支试管编号 (2)各取A、B锥形瓶酵母菌培养液的滤液2毫升,注入试管 (3)分别滴加0.5毫升重酪酸钾--浓硫酸溶液,轻轻震荡、混匀. A试管密封,B试管不密封. 六、观测、记录 条件 澄清石灰水/出现的时间 重铬酸钾--浓硫酸溶液 有氧 无氧 变混浊/快 无变化 变混浊/慢 出现灰绿色 七、实验结果 酵母菌在有氧和无氧条件下均能进行细胞呼吸。 在有氧条件下,通过细胞呼吸产生大量的CO2, 在无氧条件下通过细胞呼吸产生酒精和少量的CO2。 实验十、观察细胞的有丝分裂(p97) Ⅰ 实验原理 Ⅱ 方法步骤 (1)根尖培养 (2)装片制作:解离→漂洗→染色→制片 (3)观察:低倍镜观察 →高倍镜观察 (4)绘图: 实验三:观察植物细胞的有丝分裂 根尖、茎尖的分生区、茎形成层、愈伤组织可观察到有丝分裂。 Ⅲ 注意事项 ①培养根尖:应每天换水 (防止水中缺氧烂根) ②取材:取生长旺盛、带有分生区的根尖,长度 为根尖的2-3mm。 ③解离:解离液(15%盐酸∶95%酒精溶液=1∶1); 时间:室温3-5分钟,至根尖酥软; (时间短则细胞没有完全分离,长则可能使根尖烂掉) 目的:使组织细胞分离开,杀死并固定细胞 ④漂洗:用清水漂洗10min,目的是洗去组织中的解 离液,便于染色(防止酸碱中和)。 ⑥压片:目的是使细胞分散开。方法(用镊子弄碎根尖,盖上盖玻片,再放上一块载玻片,压片)(压片过重过猛可能将组织压碎、压烂;过轻则细胞未充分分散开而重叠。) ⑦低倍镜观察:找到分生区细胞(特点:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞正在分裂) ⑧高倍镜观察:找各时期细胞。可见处于间期的细胞最多,中期最少。不能看到某个细胞连续分裂的过程,因细胞在解离时已被杀死。 ⑤染色:染液(0.01g/mL的龙胆紫或0.02g/mL的醋酸洋红);时间为3-5分钟;目的是使染色体或染色质被碱性
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