嗜水气单胞菌喹诺酮类药物抗性决定区基因片段的.pdf

DOI :10.13327/j.j jlau.2003.01.026 吉林农业大学学报　2003, 25 (1):94 ～96, 101 Journal of Jilin Agricultural University 1 1 2 1 3 卢　强 , 郑　伟 , 李莲瑞 , 刘明远 , 于海彬 (1.解放军军需大学动物科技系, 吉林 长春 130062;2.塔里木农垦大学动物科技学院, 新疆 阿拉尔843300;3.九台市 牧局动检所, 吉林 九台130500) 　:将分离到的4 株对环丙沙星、诺氟沙星和氧氟沙星等喹诺酮类药物耐药的嗜水气单胞菌、2 株敏感 菌, 进行旋转酶基因A 亚单位(gyrA )喹诺酮抗性决定区基因(QRDR)PCR 扩增。 引物序列 A1:AGAGTTC- CTATCTTGATTACG;A2:CTGTGATGTAGGTCATCAACT, 在gyrA 基因中的位置分别为53 ～73 和620～ 640。 PCR 扩 增后, 将扩增产物克隆到pMD-18T 载体, 酶切鉴定后测序。用DNA star 软件分析比较其蛋白序列, 发现4 个 氨基酸突变位点, 分别是83 位点的Ser-Ile(4 株耐药菌), 92 位点的Leu-Met(4 株耐药菌), 174 位点的 Ile- P e(3 株耐药菌), 202、203 位点的Asn、Leu-Asp、Arg(3 株耐药菌, 另1 株 Leu 未突变), 83 位点的突变与大肠 杆菌等一致, 122 位点具有保守的Try, 耐药菌突变后的氨基酸残基分子量均比对应增大。4 株耐药菌、2 株敏 感菌的喹诺酮抗性决定区基因片段序列已登录GenBank, 注册号AY039655, AY039656, AY138539, AY138540, AY138537, AY138538。 :嗜水气单胞菌;氟喹诺酮药物;gyrA 基因;突变 :S853.74　　　:A 　　　:1000-5684 (2003)01-0094-03 Cloning and Sequence Mutation Analysis of Quinolone Resistance Determining Regions of Pathogenic Aeromonas hydrophil 1 1 2 1 3 LU Qiang , ZHENG Wei , LI Lian-rui , LIU Ming-yuan , YU Hai-bin (1.Faculty of Animal Science and Veterinary Medicine, The Quartermaster University of P A, Chang- chun,Jilin 130062, China;2.Institute of Animal Science and Technology, Tarim University of Agricul- ture Reclamation, Alar, Xinjiang 843300;3.Animal Checking Department of Jiutai, Jiutai, J ilin 130500, China ) Abstract:In order to invesgate t e mec anism of quinolones drug resistance of Aeromonas hydrophil, t e genome of four drug resistant strains, two susceptible strains isolated in Jilin Province were amplified by