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- 2019-06-17 发布于四川
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- | 2009-05-26 颁布
- | 2009-10-01 实施
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ICS 65. 120
B 46 OB
中华人民共和国国家标准
GB/T 23874—2009
饲料添加剂木聚糖酶活力的测定
分光光度法
Determination of xylanase activity in feed additives —
Spectrophotometric method
2009-05-26 发布 2009-10-01 实施
发布
GB/T 23874—2009
本标准的附录A为资料性附录。
本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出并归口。
本标准由中国农业大学农业部饲料工业中心、武汉新华扬生物有限公司、广东溢多利生物技术股份
有限公司负责起草。
本标准主要起草人:陆文清、曹云鹤、刘兴海、詹志春、刘亚力、陈清华。
T
GB/T 23874—2009
饲料添加剂木聚糖酶活力的测定
分光光度法
1范围
本标准规定了用分光光度法测定饲料添加剂中木聚糖酶的活力。
本标准适用于饲料添加剂木聚糖酶产品,最低检出量为10.0 U/go
2规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款 。凡是注日期的引用文件 ,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的必威体育精装版版本 。凡是不注日期的引用文件,其必威体育精装版版本适用于本标准。
GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法
3原理
木聚糖酶能将木聚糖降解成寡糖和单糖 。还原性寡糖和单糖在沸水浴条件下可以与3,5-二硝基
水杨酸(DNS)试剂发生显色反应 。反应液颜色的深度与酶解产生的还原糖量成正比 ,而还原糖的生成
量又与反应液中木聚糖酶的活力成正比 。因此,通过分光比色测定反应液颜色的强度,可以计算反应液
中木聚糖酶的活力。
在37 C、pH为5.50的条件下,每分钟从浓度为5 mg/mL的木聚糖溶液中降解释放1 mol还原
糖所需要的酶量为一个酶活力单位U。
4试剂与溶液
除特殊说明外,所用的试剂均为分析纯 ,水均为符合GB/T 6682中规定的二级水。
4. 1氢氧化钠溶液,浓度为200 g/L
称取氢氧化钠20. 0 go加水溶解,定容至100 mLo
4.2乙酸溶液,浓度为0. 1 mol/L
吸取冰乙酸0. 60 mLo加水溶解,定容至100 mLo
4.3乙酸钠溶液.浓度为0.1 mol/L
称取三水乙酸钠1.36 go加水溶解,定容至100 mLo
4.4乙酸-乙酸钠缓冲溶液,浓度为0. 1 mol/L,pH为5.50
称取三水乙酸钠23. 14g,加入冰乙酸1.70 mL0再加水溶解,定容至2 000 mL0测定溶液的pH。
如果pH偏离5. 50,再用乙酸溶液(4. 2)或乙酸钠溶液(4. 3)调节至5. 50。
4.5 木糖溶液(C5H10O5),浓度为 10. 0 mg/mL
称取无水木糖1.000 g,加乙酸-乙酸钠缓冲溶液 (4. 4)溶解,定容至100 mLo
4.6木聚糖溶液.浓度为100 mg/mL
称取木聚糖(Sigma X0627n)1.00 g,加人0.32 g氢氧化钠,再加入90 mL水,磁力
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