GB/T 20574-2006蜂胶中总黄酮含量的测定方法　分光光度比色法.pdf

ICS 65.020. 01 B 40 中华人民共和国国家标准 GB/T 20574—2006 蜂胶中总黄酮含量的测定方法 分光光度比色法 Method for determination of total flavonoids in propolis — Colorimetric method 2006-09-14 发布 2007-01-01 实 发布 GB/T 20574—2006 ■ 1 / ■ ■ 1 刖 a 本标准由中华全国供销合作总社提出并归口。 本标准起草单位：国家蜂产品质量监督检验中心。 本标准主要起草人：马兰宇、曾纪琰。 本标准为首次发布。 请注意本标准的某些内容有可能涉及专利 。本标准的发布机构不应承担识别这些专利的责任。 T GB/T 20574—2006 引 言 黄酮类化合物的测定有多种方法，如液相色谱法、分光光度法等 。液相色谱法可以测定单一的黄酮 成分，分光光度比色法可以测定黄酮成分的总量。 本标准采用分光光度比色法，该方法具有设备要求简单、操作简便、易于推广普及的特点。 n GB/T 20574—2006 蜂胶中总黄酮含量的测定方法 分光光度比色法 1范围 本标准规定了蜂胶中黄酮类化合物的总含量测定方法。 本标准适用于蜂胶,包括原始蜂胶、精制蜂胶及蜂胶的乙醇溶液。 本标准可用于测定黄酮类化合物的总含量在0. 1%以上的蜂胶。 2原理 溶于乙醇的黄酮类化合物在弱碱性条件下，与显色剂三价铝离子结合生成有色物质 ，可在415 nm 波长附近产生最大吸收 。在一定浓度范围内，其吸光度与黄酮类化合物的含量成正比 。与标准曲线比 较，可定量测定黄酮类化合物的含量。 3试剂和材料 除非另有说明，在分析中至少使用分析纯试剂和蒸憎水或去离子水。 3. 1 乙醇(95%)。 3. 2无水乙醇。 3.3硝酸铝溶液 (100 g/L)：称取A1(N()： Q • 9H2() 17. 60 g,加水溶解，定容于100 mL容量瓶中， 摇匀。 3.4醋酸钾溶液(9. 8 g/L)：称取酷酸钾9. 814 g,加水溶解，定容于100 mL容量瓶，摇匀。 3.5芦丁标准溶液 3.5. 1芦丁对照品储备液(1.0 g/L)：精密称取经120°C减压真空干燥至恒重的芦丁对照品50 mg,置 于50 mL容量瓶中，加无水乙醇(3. 2)溶解并稀释至刻度,摇匀。 3. 5. 2芦丁对照品使用溶液(0. 2 g/L)：精密吸取芦丁对照品储备液(3. 5. 1)10 mL,置于50 mL容量 瓶中，加无水乙醇(3. 2)至刻度，摇匀。 4仪器设备 4. 1可见分光光度计。 4.2减压干燥箱(真空；温度200C)。 4. 3 高速组织捣碎机：8 000 r/min〜12 000 r/rnin。 5试样的制备 5. 1原始蜂胶 原始蜂胶指未经过提纯处理的天然蜂胶。 5. 1. 1将同一份样品的所有蜂胶块(取约50 g~100 g)置于冷冻条件下冷冻 ，待其变硬变脆后，用木锤 敲打砸成小碎块，用高速组织捣碎机(4. 3)粉碎后 ，过14目