微生物检测-第二章.pptVIP

第二章 微生物检验的基本程序Microorganism examination procedures 一、检验前准备 Preparation for Microorganism Examination 二、样品的采集 Sampling 科学的取样方案和正确的样品制备方法是必不可少的条件。 要了解产品加工的批号、原料的来源、加工方法、保藏条件、运输、销售中的各环节，以及销售人员的责任心和卫生知识水平等。 无论采取何种方案，都要实行随机抽样。 1 微生物限度检验的特殊性Particularity of the Microbial Limit Testing 2 抽样对微生物限度检测的影响 Effect of Sampling on Microbial Limit Testing 3 样品的种类 Sample Type 样品可分为大样、中样和小样。 大样：一整批样品 中样：从样品各部分取得的混合样 小样（检样）:分析用的样品。 抽样量：指从全批产品（或全过程） 抽取的单位包装。 检验量：是指检验用量，是抽样量各包装的混合样品的一部分。 检验量与抽样量是两种不同的范畴的量，抽样量大于检验量。 4 采样方法Sampling Method 必须在无菌操作下进行 袋装、瓶装、罐装品，应采完整的未开封的样品 如果样品很大，用无菌采样器采集 固体样品：粉末状的边取边混，小块大包装品从不同部位的小块取样，大块整体样品从不同部位取样，兼顾表面和深度 半固体样品，用无菌勺从几个部位挖取 液体样品振摇混匀，用100mL无菌注射器抽取 冷冻品，保持冷冻状态 根据检验目的，确定取样方案 抽样： 供试品为随机抽样，一般抽样量为检验用量（2个以上最小包装单位）的3倍量。 对异常的供试品应针对性的抽样，对外观可疑污染或对有争议复验的样品应抽取可疑污染或对有争议复验的原样品。 从药品、瓶外观看出发霉、生虫及变质的药品不必再继续检验，直接判为不合格。 检样： 每次最少应分取二瓶（盒）以上的样品共10g或10ml。 中药蜜丸至少应分取4丸以上共10g。 (2)食品取样Food sampling 中样一般为250克；小样一般25克。 国际食品卫生规范委员会International Commission on Microbiological Specification for Food, ICMSF 由n、c和m组成 n是从一批被检查食品中抽取样品的数量 ，取样数 c是样品检测值超过指标值m的最大可接受抽样单位数，如果超过该值，则拒绝接受该批产品 m是每克样品中相关细菌的合格菌数限量，即指标值 例如： n=5,c=0，m=0 意味着有5个样品被检验某一病原体，如果有一个样品中含有该病原体，则该批产品不可接受。 n=5,c=0，m=102 意味着有5个样品被检验某一病原体，未见到有超过m值的样品，则该批产品可接受，即合格。 有一个额外的参数，附加指标值M，用于区分可接受的临界值和不可接受的值 在任何一个样品中，大于或等于M的值都是不可接受的 根据被检测到的微生物的浓度，三级抽样方案将食品分成三级 若计数小于m，则可接受 若计数大于m，小于M ，则处于可接受的临界处 若计数大于M ，则不可接受 例如：大肠杆菌的抽样方案可以是： n=5,c=2，m=10， M=100 意味着在5个样品中有2个样品的大肠杆菌含量在10-100之间是可接受的。但是如果有3个样品中，大肠杆菌的含量在10-100之间则不可接受；或者仅有一个样品的含量超过了100，那么该批次食品不可接受。 涉及健康危害水平的抽样方案及其应用条件 微生物危害分类ICMSF，2000 蛋制品的抽样方案 （3）生产工序监测采样Monitor Sampling in management process 车间用水：自来水从水龙头上采取冷却水，汤料用100mL无菌注射器抽取 台面、用具、从业人员：用5cm2 ,无菌采样板及5支棉签擦拭25cm2 空气:5个90mm平板置于车间四角和中部,开皿一定时间(5min), 盖盖 （4）采样数量和标签Sample Size and Sample Label 不同的食品和药品种类，采样数量各有不同 采样前或采样后，每件样品标记清楚，如品名、来源、数量、地点、采样人、采样时间。 三、样品的送检Delivery and submission of sample （1）采集好的样品送检要及时，一般不应超过3h，否则应保持在1-5℃的环境中。 （2）不得加入防腐剂 （3）对于易死亡病原菌的样品，可采用运送培养基，如：小肠结肠炎耶氏菌、空肠弯曲菌可用Cary-Blair运送