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一、名词解释
诱变育种:利用诱变剂处理微生物细胞,提高基因突变频率,再通过适当的筛选方法获得所需高产优质菌种的方法。
代谢控制发酵:是指利用生物的、物理的、化学的方法,人为的改变微生物的代谢途径,使之合成、积累、分泌我们所需要的产品的过程。
寡核苷酸介导诱变(oligonucleotide-directed mutagenesis):指在DNA水平上改变氨基酸的编码序列,也称定点诱变(site-specific mutagenesis);
补料分批培养:在分批培养过程中补入新鲜的料液,以克服营养不足而导致的发酵过早结束的缺点。
临界溶氧浓度:指不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度。
诱导酶:有些酶在通常的情况下不合成或很少合成,当加入诱导物后就会大量合成,这样的酶叫诱导酶
固定化酶:通过物理的或化学的方法,将酶束缚于水不溶的载体上,或将酶束缚于一定的空间内,限制酶分子的自由流动,但能使酶发挥催化作用的酶.
非水酶学:通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的,研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学.
抗体酶:是一种具有催化作用的免疫球蛋白,属于化学人工酶
细胞培养:是指动植物细胞在体外条件下的存活或生长,此时细胞不再形成组织.
愈伤组织:在人工培养基上由外植体长出来的一团无序生长的薄壁细胞。
接触抑制:细胞从接种到长满底物表面后,由于细胞繁殖数量增多相互接触后,不再增加。
细胞系:原代细胞经第一次传代后,形成的细胞群体,即具有增殖能力,类型均匀的培养细胞,一般为有限细胞系。
抗性互补筛选法:利用亲本细胞原生质体对抗生素、除草剂及其它有毒物质抗性差异选择杂种细胞。
细胞拆合:是指以一定的实验技术从活细胞中分离出细胞器及其组分,然后在体外一定条件下将不同细胞来源的细胞器及其组分进行重组,使其重新装配成为具有生物活性的细胞或细胞器.
基因重组 (gene recombination):是指DNA片段在细胞内、细胞间,甚至在不同物种之间进行交换,交换后的片段仍然具有复制和表达的功能。
克 隆:来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。
限制性内切酶:限制酶是在生物体(主要是微生物)内的一种酶,能将外来的DNA切断,由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的,故名限制性内切酶。
黏性末端:被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。
CCCDNA:绝大多数的天然DNA质粒具有共价、封闭、环状的分子结构,即CCCDNA。
回文结构:在切割部位,一条链正向读的碱基顺序与另一条链反向读的顺序完全一致。
基因探针:是一段与目的基因互补的核酸序列,可以是DNA,也可以是RNA,用它与待测样品DNA或RNA进行核酸分子杂交,可以判断两者的同源程度.
Dot印迹杂交:将待测DNA或RNA的细胞裂解物变性后直接点在硝酸纤维素膜上,不需要限制性酶进行酶切,既可与探针进行杂交反应.
cDNA文库:是指某生物某一发育时期所转录形成的cDNA片段与某种载体连接而成的克隆的集合。
二、填空题
1.1972年斯坦福大学的Berg等人完成了首次体外重组实验,并首次用限制性内切酶切割SV40的DNA片断与l噬菌体的DNA片断,经过连接,组成重组DNA分子,他是第一个实现DNA重组的人。
2.1973年斯坦福大学的Cohen将伤寒沙门氏抗链霉素质粒与含有四环素抗性基因的大肠杆菌质粒pSC101连接成重组质粒,具有双重抗药性。标志着基因工程的诞生。
3.基因工程的特征跨物种性、无性扩增。
4.限制性内切酶分为I、 II、III。
5.我国青年科学家陈炬成功地把人的干扰素基因嫁接到烟草的DNA分子上,使烟草获得了抗病毒的能力,试分析:烟草有了抗病毒的能力,这表明,烟草体内产生了人的干扰素。这说明人和烟草共用一套遗传密码;蛋白质合成的方法相同(填“相同”或“不同”);也说明了DNA是遗传物质。
6.限制酶是一类专门切割 DNA 的酶,它能特异性识别切割 双 链(单、双)DNA。
7.限制酶命名采用Smith和A thens提议的方案,第一个字母大写取自来源细菌的属名_;第二、三个字母取自来源细菌的__种名__;第四个字母(如果有)取自来源菌的_株 系。
8..基因工程的基本步骤 切、接、转、增、检 。
9.目的基因的提取方法 鸟枪法 ,_反转录法, _根据已知的氨基酸序列合成DNA 。
10.聚合酶链反应(PCR)的基本步骤 变性, 退火 ,延伸 。 所用的酶为TaqDNA聚合酶,酶耐热的 特性。
11.DNA序列测定常用方法有末端终止,化学裂解法,DNA测序自动化。
12.运载体的作用_将外源基因转移到受体细胞中去__, 利用运载体在受体细胞内 ,对外源基因进行大量复制_。
13.目的基因导入受体细胞常用的受体,微
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