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FPIA-3000管路清洁方法
细心操作、避免损坏任何管路
1、开机预热1小时;
2、等待仪器自检完成后,运行背景检测【Background Check】、接着运行自动对焦【Auto Focus】;
3、选择合适的对焦标样(标样需要购于Malvern)
3.1 10倍镜:2.0μm,30 000个/μL
3.2 20倍镜:1.0μm,200 000个/μL
3.3 5倍镜:3.2μm,5 000个/μL
4、如果自动对焦不成功,需要运行手动对焦【manual focus】
5、手动对焦结束后,仍然需要自动对焦【Auto Focus】一次
6、如果手动对焦【manual focus】后,再运行自动对焦【Auto Focus】,仍然失败。需要确定对焦的标样是否团聚(必要时超声)
7、如果仪器仍然对焦失败,更换镜头或者排除了其他因素(分散剂、SOP、鞘液等)仍然一样,可以大概判定仪器的对焦失败是由于样品检测的管路堵塞造成的。可以尝试下述的解决方案。
A:运行自动清洗【Autorinse】
任意用户名进入仪器运行界面
运行【Maintenance】目录
运行【Sequences】
运行【Autorinse】选项
运行5次
执行手动对焦
执行自动对焦
尝试样品检测
B:清洗管路和样品池
去处前面的加样盖,便于清洗
点击键盘上的【F12】,打开加样盖,如下图
螺丝刀拧松“1”位置的两颗螺丝并将加样盖拆卸下,如下图
再点击【F12】,关闭固定加样盖的装置
拧松仪器后面“2”位置的螺丝,如图
完成后从正面揭开仪器中间的大盖,如图
在中间盖子的后部位置,如图中【3】,有连接器,按住它取下整个中间盖
取下整个中间盖,放在安全的位置,注意螺丝的保存
使用螺丝刀取出‘X’位置的所有螺丝,如图
慢慢地卸下这一黑色的盖子(用于保护管路和进样池)
用“Sysmex user”用户登录:用户名:“sysmex”,密码:“c9.0”
选择【Maintenance】
选择【Check Testing Unit】
出现以下显示
所有的螺线管(SV)阀门都是绿色的(如SV1、SV2等)
准备一个有接头的注射器(如下图),配有适当长度FPIA-3000提供的皮管,必要的时候截断皮管。
如果使用去离子水,使用如下接头(以后遇到类似情况我们使用的方法)
如果使用溶剂,则使用如下接头
选择【Maintenance】 【Sequences】 【Flow Cell Exchange】。主要是排空残留的样品及鞘液。操作前需要用防水的布来保护仪器中的镜头,防止水滴在光学器件上。
如果体系是水溶剂,则注射器就选用Cell Sheath鞘液或者温和的2% Hellmanex稀释的溶剂;若体系采用的是溶剂,注射器就选用当前通用的鞘液。
FPIA部分管路接头
办法1
将注射器与A位置的管路接头相连
目录13条,点击【SV16】,颜色由绿变红(阀门打开)
挤推注射器,用Cell Sheath或Hellmanex冲洗管路接头
点击【SV16】,变回绿色(关闭)
点击【SV19】,打开、清空样品池,再次点击【SV19】,关闭样品池
点击【SV14】和【SV15】,待变成红色(打开)后,挤推注射器,使清洗的液体经过管路接头
再次点击【SV14】和【SV15】,变成绿色(关闭)
重复步骤18-23,3次
取下注射器,连接上原始的接头
将注射器依次连接到B和C位置(B/C各连接一次)
重复18-24
将管路接头连接到FPIA 3000
再次点击【SV14】、【SV15】、【SV16】,使他们变绿
在【Maintenance】菜单下运行自动清洗【autorinse】
进行手动对焦【manual focus】
进行自动对焦【Auto focus】,如果对焦成功,便可以进行样品测试
确定没有任何遗漏,拧紧固定A、B、C位置的接头(不要太紧)
办法2
(Sysmex认为比较有效,以后如遇到类似情况我们便使用该种方法)
选择【Maintenance】 【Sequences】 【Flow Cell Exchange】。将清空流动池
在接头D位置连接一个合适的长塑料管
取适量的2% 的Hellamanex稀释溶液或者鞘液,如下图
在C位置连接一个注射器,用注射器挤推,来回数次使得Hellamanex溶液(或者鞘液)通过流动池。连接的位置C如下图
取下连接C位置注射器,轮流连接到A、B位置,然后重复第37步操作
完全地连接好所有的接头,在【Maintenance】菜单下运行自动清洗【autorinse】
进行手动对焦【manual focus】
进行自动对焦【Auto focus】,如果对焦成功,便可以进行样品测试
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