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第一节 葡萄球菌属(Staphylococcus) 三、微 生 物 学 检 验 (一)标本采集 (二)检验程序 (三)检验方法 (四)结果评价和报告 1、金黄色葡萄球菌:无论任何标本中分离到均 应鉴定并报告临床。 2、表皮葡萄球菌及腐生葡萄球菌:从输液导管、人工植入组织中分离到,应视为致病菌。 3、尿培养计数:103-104为阳性菌尿标准。 4、其他凝固酶阴性葡萄球菌:引起感染流行或治疗失败时,应鉴定到种。 5、金黄色葡萄球菌(MRSA):头孢菌素类抗生素体外药敏试验为敏感时,不应报告,因体内试验已证实MRSA对该类抗生素耐药。 检验程序 一、生物学特性 (一)形态染色 G+球菌,单个、成双或短链状排列。无荚膜、芽胞,部分菌株有鞭毛。 第三节 肠球菌属 是肠道中的正常菌群 导致医院内感染:如尿路感染、腹部和 盆腔感染、败血症、脑膜炎。 营养要求较高。能在高盐(6.5%NaCl)、高碱(PH9.6)、高胆汁(40%)、10~45℃生长。 菌落:圆形、中等大小、灰白色、不透明、S型,有γ或α溶血。 (二)培养特性 能分解多种糖类 触酶(-) PYR(吡咯烷酮-β-萘基酰胺)试验(+) (三)生化反应 目前分18种。引起医院内感染常见的是粪肠球菌和屎肠球菌。 常用的分型方法:rRNA基因探针分型法。 (四)分型 (五)抵抗力 对理化因素抵抗力弱。 但对大多数抗生素天然耐药。 二、微生物学检验 (一)标本采集 尿液、血液、脑脊液、脓汁分泌物等。 (二)检验程序 尿液、脓汁、穿刺液 血 液 涂片染色 分离培养(血平板、5%CO2) 初 报 挑选可疑菌落 增菌培养(葡萄糖肉汤、5%CO2) PYR试验 胆汁七叶苷试验 6.5%NaCl生长试验 血清学试验 其他鉴定试验 报 告 (三)检验方法 1、直接镜检 适用于:痰、脓、脑脊液、穿刺液标本。 2、分离培养 血平板:灰白色,圆形,中等大小,不透明,S型菌落,周围有α溶血或γ溶血。 选择培养基:叠氮胆汁七叶苷琼脂平板。 3、鉴定试验 (1)菌属鉴定试验: ①PYR试验:肠球菌、A群链球菌、某些凝固酶阴性葡萄球菌为(+) ②胆汁七叶苷试验:+ ③ 盐耐受试验:+ (4)种间鉴定试验:P175表17-3 第四节 奈瑟菌属(Neisseria) 特点:为一群G-双球菌,无鞭毛,无芽胞,有菌毛,需氧,氧化酶及触酶 +。 种类:共九种,主要致病菌是 脑膜炎奈瑟菌(merningococcus) 淋病奈瑟菌(gonorrhoeae) 一、脑膜炎奈瑟菌 (N.meningitidis) 即脑膜炎球菌, 是流行性脑脊髓膜炎的病原体 (一)生物学性状 1.形态结构 2.培养特性 3.生化反应 4. 抗原结构 5. 抵抗力特点 (一)形态结构 G-,肾形成双排列 在患者脑脊液标本中位于中性粒细胞内 无芽胞、无鞭毛,具有荚膜、菌毛。 2.培养特性 营养要求高,必须在含有血清或多种氨基酸、无机盐的培养基上生长良好。 血平板:半透明,灰褐色,圆形,湿润光滑露滴样菌落。 易自溶。 巧克力平板:圆形,扁平,蓝灰色,半透明,光滑湿润的菌落。 卵黄双抗(EPV)平板:较大,无色,光滑湿润,扁平,边缘整齐的菌落。 血清肉汤:呈微混浊。 3.生化反应 分解葡萄糖、麦芽糖:+ 硝酸盐还原试验阴性,不分解尿素 氧化酶试验阳性 4.抗原结构 可分9个血清群,对人致病的主要是A群 5.抵抗力特点 对寒冷、光、热力,干燥等十分敏感。室温3h,60 ℃ 5min死亡。 采集标本:注意保温迅速送检。 对磺胺类、青霉素、链霉素均敏感。 (二)致病性与免疫性 1.致病物质:菌毛、荚膜、内毒素 2.所致疾病:传染源、传播途径 寄生在正常人鼻咽部,存在易患人群,与患者补体介导的杀菌活性缺陷有关。约2%-3%的人表现为流脑症状。 3. 免疫性 病原可产生群特异性抗体,但不持久。 (三) 微生物学检验 1.标本采集 菌血症期病人采集血液 有出血点或瘀斑者,可取瘀斑渗出液 有脑膜刺激症状,抽取脑脊液 带菌者:咽拭子 注意事项: 立即送检 注意保温(勿放冰箱) 防干燥 防紫外线 2、脑膜炎球菌的检验程序 血 液 增菌培养(葡糖肉汤) 分离培养 (巧克力、血平板) 鉴定试验 涂染检 氧化酶 葡、麦糖 多价血清 药敏试验 结果报告 鼻咽拭子 卵黄双抗平板 5~10%
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