HN禽流感病毒-实验室检测.pptVIP

病例定义 人感染H7N9禽流感疑似病例与确诊病例定义参照《人感染H7N9禽流感诊疗方案（2013年第2版）》（卫发明电〔2013〕17号）。 标本采集、运送 当医务人员怀疑病人感染H7N9禽流感病毒时，应当尽早采集其上、下呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清以及与急性期血清采集时间间隔2-4周的血清等。 标本采集、运送 对符合卫生部发布的《人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第二版）》 中规定的病例定义的病人进行采样。 上呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液） 下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本） 标本采集、运送 血清标本：发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复期血清 尸检标本 环境标本：禽类粪便、笼具涂拭标本和环境污水等标本 标本采集 要求 呼吸道标本：发病早期采样，采集的呼吸道标本每份分为3 管，每份不少于1ml。 血清标本：每份分为2管，每管不少于0.5ml。 标本采集、运送 标本采集、包装、运送等应当严格按照《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》（卫生部第45号令）等生物安全相关规定执行。 标本采集、运送： H7N9禽流感病毒实验室活动和样本运输按照《人间传染的病原微生物名录》中高致病性禽流感病毒进行管理。 实验室检测 有条件开展核酸检测的医疗机构要对呼吸道标本开展H7N9病毒核酸检测，进行病例诊断，并指导早期应用抗病毒药物；没有条件开展核酸检测的医疗机构应当尽快利用快速抗原检测试剂进行甲型流感病毒抗原检测，并将甲型流感病毒抗原检测阳性的标本送当地流感监测网络实验室进一步开展H7N9病毒核酸检测。 实验室检测 流感样病例强化监测 尚未发生人感染H7N9禽流感病例的地区，在既往流感样病例监测工作基础上，要提高监测强度。增加标本采集和检测数量，南方省份每家流感监测哨点医院每周采集流感样病例和人感染H7N9禽流感相关病例标本20份，送当地流感监测网络实验室开展检测。 相关技术文件 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 标本采集 　为进行病例诊断，医疗机构应尽早采集病人的相关临床样本。采集的临床标本包括病人的上呼吸道标本（如咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液）、下呼吸道标本（如气管吸取物、肺洗液、肺组织标本）和血清标本等。 　　 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 应当尽量采集病例发病早期的呼吸道标本（尤其是下呼吸道标本）和发病7天内急性期血清以及间隔2-4周的恢复期血清。如病人死亡，应当尽可能说服家属同意尸检，及时进行尸体解剖，采集组织（如肺组织、气管、支气管组织）标本。医疗机构采集的呼吸道标本每份不少于3ml。血清标本每份分为2管，每管不少于0.5ml。 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 对人感染H7N9禽流感确诊病例可能暴露的禽类饲养或交易等场所，由疾控机构采集禽类粪便、笼具涂拭标本和环境污水等标本，技术要求参考《职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案（2011年版）》。（/jkzt/crb/rgrgzbxqlg_5295/rgrglgyh/） 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 当地流感监测网络实验室收到标本后24 小时内，立即对呼吸道标本开展甲、乙型流感病毒通用引物，H5、H7亚型的检测。 若当地流感监测网络实验室检测结果为H5、H7核酸检测阳性时，应当于12小时内将其中2管呼吸道相关原始标本送至省级疾控中心流感网络实验室。 若当地流感监测网络实验室检测到甲通阳性，不能分亚型的标本，要12小时内送省级疾控中心流感网络实验室。 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 标本分装： 流感网络实验室收检的呼吸道标本每份分为3管，每管应不少于1ml。1管用于检测，另外2管用于复核和病毒分离。标本储存应在-70℃或以下温度，避免反复冻融。 人感染H7N9禽流感病毒标本采集及实验室检测策略 H7N9禽流感病毒检测方法： H7N9禽流感病毒检测方法： Realtime PCR检测方法： 引物探针、阳性对照由国家流感中心和四川省疾控中心统一下发 请认真阅读引物探针说明。 H7N9流感病毒检测方法 将新合成的引物探针在开盖前短暂离心 用RNase Free Water溶解，管上标记为Xul/100pmol ,引物加上X的2.5倍体积的水，探针加上X的5倍体积的水，变成为使用浓度。 引物/探针未溶解前（干粉状态）4℃保存。 引物/探针溶解之后 -20℃或 -20℃以下保存（注意：反复冻融易导致引物/探针降解，