基因工程一轮复习教学案(教师版).docVIP

基因工程 知识点1：基因工程概念理解 别名 基因拼接技术或DNA重组技术、转基因技术 操作环境 生物体外 操作对象 DNA（基因） 操作水平 分子水平 原理 基因重组 过程 －－－－－－－－－－－－－－－－－－－－ 优点 定向改造生物的遗传性状（目的性强）、克服远缘杂交不亲和的障碍 【典例1】下列叙述符合基因工程概念的是(B) A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 思考：基因工程成功的原因？ = 1 \* alphabetic a、DNA相同的分子组成和空间结构 = 2 \* alphabetic b、密码的通用性，都遵寻中心法则（碱基互补配对原则） 知识点2：基因工程（DNA重组技术）的基本工具 1、限制性核酸内切酶（限制酶）－“分子手术刀” 来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（酵母菌中也有） 功能：识别双链ＤＮＡ分子中特定的核苷酸序列，并在特定位点切割 结果：粘性末端或平末端（图例说明） 在基因工程中何时使用：在获取目的基因时、构建基因表达载体时 【典例２】下列关于限制酶的说法不正确的是（ ） 　Ａ、一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列　　Ｂ、限制酶可用于提取目的基因 　Ｃ、不同的限制酶切割DNA的切点一般不同　　　Ｄ、限制酶广泛存在于动植物及微生物中 【典例３】已知某种限制酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点，如下图中箭头所指。如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子，若在每个DNA分子上至少有一个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生不同的DNA片段种类数是（C ） 　　A. 3 　　 B. 4 　　　 C. 9 　　　 D. 12 2、DNA连接酶－“分子缝合针” 功能：恢复被限制酶切开的磷酸二酯键 种类：E.coli DNA连接酶－连接粘性末端 T4DNA连接酶－连接平末端（效率低） 注意：限制酶、DNA连接酶、DNA（水解）酶、DNA聚合酶之间的区别。 【典例４】据图所示，有关工具酶功能的叙述错误的是（D ） 　A．限制性核酸内切酶可以切断a处 　B．DNA聚合酶可以连接a处　C．解旋酶可以使b处解开 　D．DNA连接酶可以连接c处 3、运载体－“分子运输车” 种类：质粒（最常用）、噬菌体（衍生物）、动植物病毒。 具备的条件： = 1 \* alphabetic a、能在宿主细胞内稳定存在并大量复制（不影响宿主本身） = 2 \* alphabetic b、有１个或多个限制酶的切点 = 3 \* alphabetic c、有标记基因 注： = 1 \* GB3 ①携带外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA同步复制。 = 2 \* GB3 ②在进行基因工程操作中，真正被用作载体的质粒，都是在天然质粒基础上进行人工改造的。 【典例５】质粒之所以能做基因工程的运载体，是由于它（B ） A、含有蛋白质，从而能完成生命活动 B、能够自我复制，从而保持连续性 C、是RNA，能够知道蛋白质合成 D、具有环装结构，能够携带目的基因 【典例６】下列各项中，a、b、c、d代表的结构正确的是（D） A．a——质粒RNA B．b——DNA连接酶 C．c——限制性内切酶 D．d——外源基因 知识点３：基因工程的操作步骤 1、获取目的基因 目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因 方法：从基因文库中获取（针对序列未知的，从自然界中已有的物种中分离出来） 　　　PCR技术扩增（将已有的基因进行扩增） 　　　通过人工方法化学合成（有反转录法和直接化学合成法） 注意：①基因组文库和cDNA文库的区别 ②从基因组文库中获取－用限制酶切割、分离；（此时限制酶在目的基因前后各要切割一次） 2、基因表达载体的构建 (核心) 目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。 表达载体的组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 图示区别：启动子、终止子、起始密码子、终止密码子 如何构建基因表达载体？ 用同一种限制酶（只要形成的粘性末端相同就行）切割载体 （一个切口两个黏性末端）和含有目的基因的DNA分子 （两个切口