GB/T 23195-2008蜂花粉中过氧化氢酶的测定方法　紫外分光光度法.pdf

ICS 65. 140 B 47 中华人民共和国国家标准 GB/T 23195—2008 蜂花粉中过氧化氢酶的测定方法 紫外分光光度法 Method for the determination of catalase in bee pollen— Ultaraviolet spectrophotometry 2008-12-31 发布 2009-06-01 实施 发布 GB/T 23195—2008 —1— 刖 6 本标准由中华全国供销合作总社提出并归口。 本标准起草单位：广州市宝生园有限公司、华南农业大学。 本标准主要起草人:郑尧隆、刘伟、陈伟彬。 I GB/T 23195—2008 蜂花粉中过氧化氢酶的测定方法 紫外分光光度法 1范围 本标准规定了蜂花粉中过氧化氢酶的测定方法。 本标准适用于蜂花粉中过氧化氢酶的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单（不包括勘误的内容）或修订 均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的必威体育精装版 本。凡是不注日期的引用文件，其必威体育精装版 本适用于本标准。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法（GB/T 6682—2008,ISO 3696： 1987,MOD） 3原理 过氧化氢在240 nm波长下有强烈吸收，过氧化氢酶能分解过氧化氢，使反应溶液吸光度在一定范 围内随反应时间而降低，根据测量吸光度的变化速度即可测定过氧化氢酶的活性。 4试剂 除非另有说明，在分析中仅使用分析纯试剂和符合GB/T 6682要求的蒸憎水或去离子水。 4. 1 磷酸缓冲液；pH为6. 8-7. 0,浓度为50 mmol/L,含有1 mmol/ 乙二胺四乙酸二钠（EDTA）。 准确称取17. 91 gNa2HPO4 • 12H2（）加蒸惘水溶解并稀释至500 mL,作为A液； 准确称取7. 80 g NaH2PO4 • 2H2O加蒸懈水溶解并稀释至500 mL,作为B液； 准确量取55.0 m A液与45.0 m B液于200 m 烧杯中，加入0. 07 g EDTA,加蒸惘水稀释混 匀（加至150 m 左右），用酸度计标定至6. 8-7.0,转入200 m 容量瓶中，定容至刻度，混匀。 4.2过氧化氢溶液:体积分数为0.1%。 准确吸取0. 5 m 30%过氧化氢置于50 m 棕色容量瓶中，用磷酸缓冲液（4. 1）定容至刻度，混匀， 从中准确量取10. Om 于100 m 三角锥瓶（避光）中，再准确量取20. 0 m 的磷酸缓冲液（4. 1）加入混 匀即得。 4.3液氮。 5仪器设备 5. 1紫外分光光度计。 5.2冷冻离心机。 5.3恒温水浴锅。 5.4酸度计。 5. 5分析天平:感量0. 1 mg。 5. 6 移液枪：100 mL,5 000 mLo 6待测液的制备 称取1 g样品，精确到1 mg,置于已用适量液氮预冷的瓷研钵中，边加液氮边研磨，待样品充分研