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7.1.2吸收光谱 7.4吸光光度法的仪器 一般由光源、单色器(分光系统)、吸收池、检测系统和信号显示系统等五部分组成。 (一)光源 常用的光源为6-12伏低压钨丝灯,电源由温器供给,为了保持光源强度的稳定,以获得准确的测定果,电压必须稳定。 (二)单色器(分光系统) 单色器的作用从光源发出的复合光中分出所需要的单色光。 单色器通常由由入射狭缝、准直镜、色散元件、聚焦镜和出射缝组成。 (三)吸收池(比色皿) 比色皿是用透明无色的光学玻璃制作的。大多数比色皿为长方形,也有圆柱形的。一般厚度为0.5、1、2和3厘米。 (四)检测系统(又叫光电转化器) 在光度计中,常用的是硒光电池。晒光电池和眼睛相似,对于各种不同波长的光线,灵敏度是不同的。对于波长为500-600nm的光线最灵敏。而对紫外线,红外线则不能应用。 光电管和光电倍增管用于较精密的分光光度计中。具有灵敏度高、光敏范围广及不易疲劳等特点。 (五)信号显示系统 早期使用的是检流计、微安表、电位计、数字电压表、自动记录仪等。 现代的分光光度计广泛采用数字电压表、函数记录仪、示波器及数据处理台等。 测量光电流的检流计常用悬镜式检流计(也称作直流复射式检流计),其灵敏度可达10-9安培/格。为了保护检统计,使用中要防止震动或大电流通过。检流计标尺上有两种刻度,等刻度的是表示百分透光率(T%),对数刻度表示吸光度(A)。 根据透光率T,如果把入射光强度IO当作IO光强单位,透过光强度当作100光强单位中的一部分,这一数值为百分透光度,亦称为百分透光率。 邻二氮菲比色法测定水样中铁的含量 一、实验目的 1、学会使用721型分光光度计,了解和掌握分光光度法测定原理。 2、学会邻二氮菲法测定试样中微量铁含量的原理及方法。 3、了解分光光度计的构造及使用。 4、学会标准曲线的方法。 二、实验原理 邻二氮菲是测定微量铁的一种较好试剂,?? 在pH=2.0~9.0的条件下,Fe2+与邻二氮菲生成很稳定的橙红色的络合物,反应式如下: 配合物的配合比为3 :1。Fe3+与邻二氮菲作用形成蓝色配合物,稳定性较差,因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺,使 Fe3+还原为Fe2+,与显色剂邻二氮菲作用。 在显色前,首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+: 4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+ 测定时,控制溶液酸度在pH=2~9较适宜,酸度过高,反应速度慢,酸度太低,则Fe2+水解,影响显色。Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀,Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物,因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。 三、仪器和药品 仪器 721型分光光度计(722型分光光度计)容量瓶8个(50mL),10mL移液管(有刻度)1支,5mL移液管(有刻度)1支,5mL量筒1个,500mL烧杯1个,洗瓶1个,洗耳球1个,小滤纸,镜头纸。 药品 (1)铁标准溶液(100 ) 准确称取0.8634g铁盐NH4Fe(SO4)2·12H2O,置于烧杯中,加入20mL 6mol/L HCl和少量水,溶解后,定量转移入1L容量瓶中,加水稀释至刻度,充分摇匀。 (2)铁标准溶液(10 ) 用移液管移取上述标准溶液10.00mL,置于100mL容量瓶中,加入6mol/L HCl 2.0mL,然后加水稀释至刻度,充分摇匀。 (3)10%盐酸羟胺溶液(新配制) (4)0.1%邻二氮菲溶液(新配制) (5)HAc-NaAc缓冲溶液(pH≈5.0)。称取136g NaAc ,加水使之溶解,在其中加入120mL冰醋酸,加水稀释至500mL 。 四、内容及步骤 1、邻二氮菲-Fe2+ 吸收曲线的绘制 用吸量管吸取铁标准溶液(10 ) 0.0、2.0、4.0mL分别放入50mL容量瓶中,加入1mL 10%盐酸羟胺溶液、2.0mL 0.1%邻二氮菲溶液和5mLHAc-NaAc缓冲溶液,加水稀释至刻度,充分摇匀。放置5min,用3cm比色皿,以试剂溶液为参比溶液(即在0.00mL铁标准溶液中,加入相同试剂),在721分光光度计中,在420~600nm波长范围内分别测定其吸光度值。在临近最大吸收波长处应间隔波长5~10nm测其A值,其他各处可间隔波长20~40nm测其A值。然后以波长为横坐标,所测A值为纵坐标,绘制吸收曲线,并找出最大吸收峰的波长,以 表示。 2、标准曲线的绘制 用吸量管吸取铁标准溶液(10
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