课件:十四医院环境微生物.ppt

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* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 3. 血液透析水和透析液染菌量监测流程 样本采集:透析用水在进入透析机位置收集;透析液在进入透析器位置收集。 样本接种、培养、菌落计数方法同上。 标准:菌落总数≤200cfu/ml,并不得检出致病微生物。 Page * 4.使用中消毒剂污染监测流程 采样时间:每个季度 采样方法:无菌吸取1ml消毒剂,加入9ml相应中和剂,混匀,立即送检。 接种:倾注法,普通营养琼脂 培养并计数:20 ℃培养7d观察并计数霉菌菌落数; 37 ℃培养3d,计数细菌数并检测致病菌。 结果计算分析:标准≤ 100cfu/ ml,不得检出致病性微生物。 Page * 医院感染微生物检测 常见医院感染部位的微生物学检验 临床微生物样本采集 采集方法 送检原则 判定不符合要求的标本 病原体分离培养鉴定 病原体药物敏感性试验 Page * 抗菌药物敏感性试验 定性(纸片琼脂扩散法,即Kirby-Bauer法) 纯化菌落:在血平板、麦康凯等分离纯化出单个菌落 菌液制备:挑取数个菌落,用生理盐水将菌液浓度调整至0.5麦氏单位(5.0×107~5.0×108cfu/ml); 涂布MH平板:用棉签沾取稀释好的菌液均匀涂布3次,平板內缘再涂抹一次,即涂满平板; 贴含药纸片:用无镊子将药片紧贴于琼脂表面,纸片中心间> 24mm,距内缘> 15mm; 培养18~24h,根据抑菌圈直径作出敏感、耐药、中介。 定量(MIC、MBC)——手工或仪器分析 Page * 以肺炎链球菌药敏试验结果判断标准为例 肺炎链球菌药敏试验结果判断标准 Page * 医院感染微生物检测 医院感染暴发时的微生物学检验 样本采集种类 临床样本 环境样本 病原体分离鉴定 病原体同源性检测 Page * 病原体分型方法 表型分型法(血清学、噬菌体等分型) 分子分型法(质粒图谱分析方法) 临床分离株及质控株 质粒提取过程(具体见实验六部分) 质粒提取物电泳 质粒酶切电泳图谱分析 Page * 同源性分析例 例1 对MARS流行病学分型方法,主要有表型分型方法,如噬菌体(4组23种噬菌体)分型,耐药谱分型等;分子分型方法,如脉冲场凝胶电泳、随机引物扩增多态性DNA及DNA指纹图谱分型等。 例2 1996年在解放军某医院外科病区,从6名患者的血液、大静脉插管、腹腔引流液中分离出14株绿脓假单胞菌,血清型分型皆属同型。用单引物PCR指纹图谱分型方法,指纹图谱完全相同,判定此次医院感染由绿脓假单胞菌引起。 Page * 医院环境微生物卫生标准 空气 物体表面 医护人员的手 GB15982-1995医院消毒卫生标准(因不同科室细菌标准不同) Page * 医院各类科室或区域空气、物体表面、医护人员手菌落总数限值标准 *空气采样为自然沉降法 Page * 医院污水消毒处理后排放 医院污水(消毒后)的排放标准 参照GB18466-2005《医疗机构水污染物排放标准》 指标包括:粪大肠菌群数、肠道致病菌、肠道病毒、结核杆菌,总余氯等(传染病院、结核病院排放的污水和污泥微生物指标要求不同) Page * 第四节 医院环境微生物污染的预防与控制技术 Page * 要采取综合性措施预防与控制医院环境微生物污染,包括医院建筑设计,房屋布局、通道、通风等,有效的消毒隔离,对医护人员进行医院感染、用药、临床微生物知识相关培训,加强职业防护。采取的主要措施包括: Page * 隔离防护措施 加强医院环境卫生学消毒及消毒灭菌效果监测 提高医务人员的职业防护水平 对医院感染开展目标性监测 合理使用侵入性诊疗手段 合理使用抗菌药物和其他药物 对医疗废弃物处理要得当 医院污水消毒处理排放要符合国家卫生标准 Page * 第五节 医院环境微生物研究前景 Page * 医院环境微生物的研究发展前景问题 医院感染微生物快速检测及分型研究 侵入诊疗器械消毒灭菌技术研究 临床分离菌株对抗生素和消毒剂的耐药机制研究 Page * 思考题 检验科控制医院感染的主要措施有哪些? 医院的生境特性及其微生物特点? 分析医院感染上升原因有哪些? 医院环境微生物监测内容有哪些? 控制医院感染微生物的主要措施有哪些? 医院感染相关微生物研究的发展问题有哪些? Page * THANK YOU SUCCESS * * 可编辑 * * * * * * * * * * * 结果判定 Page * 新生儿室环境物品和医务人员手卫生标准按照GB15982《医院消毒卫生标准》规定的标准,细菌总数≤5cfu/cm2,不得检出致病菌,判定合格; 母婴同室、婴儿洗澡间等环境细菌总数≤10cfu/ cm2,不得检出致病菌,判定

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