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实验五 白细胞分类计数;一、实验目的
掌握显微镜外周血白细胞分类计数(DLC)的方法;
掌握外周血各类白细胞的正常形态。
;
二、实验原理
将血液制成细胞分布均匀的血涂片,用瑞氏染液染色,根据各类细胞的形态特点和颜色差异将白细胞区别并进行计数。通常计数100个白细胞,计算得出各种白细胞所占的百分率。;三、实验器材与试剂
器材: 显微镜,香柏油,擦镜纸,清洁液
试剂:Wright 染液。
四、实验标本:制备良好的血涂片
; 五、操作步骤
1.制备血涂片:按照正确的操作方法制备血涂片
2.染色:用Wright染液对血涂片染色,冲洗干净,自然干燥后备用 。
3.低倍镜观察:低倍镜下观察全片,包括白细胞飞分布和染色情况。;
4.油镜观察:选择血涂片体尾交界处细胞分布均匀、着色良好的区域,滴加1滴香柏油,按一定的方向顺序对所见到的每个白细胞进行分类,并用白细胞分类计数器做好记录,共计数100个白细胞。;
5.计算:求出各类白细胞所占的百分率。
6.报告方式: 百分率(%)。
;六、参考区间; 七、注意事项
1.计数区域:以体尾交界处最佳。
2.分类方法:遵循一定的方向,以“城垛式”连续进行,避免主观选择视野;结果的记录可采用计数器、手工画“正”字或“+++++”。
3.计数的白细胞数:白细胞总数在(3.0~15.0)×109/L之间者,分类计数100个白细胞;总数在15.0×109/L以上时,计数200个;总数低于3.0×109/L时,应选用两张血涂片计数50~100个白细胞。;4.计数结果:用各类白细胞的百分率乘以白细胞总数,即可求得每升血液中各类白细胞数量的绝对值。
5.血涂片中有有核红细胞时,应逐个计数,但不计入100个白细胞内,以分类100个白细胞过程中见到的有核红细胞个数来报告,并注明其所属阶段。
6.分类中还应注意观察成熟红细胞、血小板的形态、染色及其分布情况,注意有无寄生虫(如疟原虫)及其他异常所见。
;外周血各类白细胞的正常形态;白细胞;全能干细胞;中性粒细胞(Neutrophil,N);淋巴细胞(Lymphocyte,L);单核细胞(Monocyte,M);嗜碱性粒细胞(Basophil,B);嗜酸性粒细胞(Eosinophil,E);1.中性粒细胞(N);按胞核的形态分为:;中性粒细胞;杆状核;分叶核;2. 嗜酸性粒细胞(E);嗜酸性粒细胞 (血涂片);3. 嗜碱性粒细胞(B);嗜碱性粒细胞 (血涂片);4. 淋巴细胞(L);淋巴细胞 (血涂片);5.单核细胞(M);五类白细胞;外周血正常白细胞形态特征;四、一些异常结构及细胞的认识;1.核左移
外周血中杆状核粒细胞增多或出现晚幼粒、中幼粒、早幼粒细胞;2.核右移:主要见于营养性巨幼细胞性贫血、恶性贫血等;3. 毒性变化;
;大小不均;
;中毒颗粒:粗大、大小不等、分布不均匀的紫黑色或深紫红色颗粒。;
;退行性变;
;空泡;
;杜勒体;异形淋巴细胞
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